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目的：分别构建尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGT1A1）基因野生型、G71R纯合突变型重组质粒，利用脂质体介导转染于COS-7细胞，并检测UGT1A1的表达，为后续研究UGT1A1基因突变表达提供工具、奠定实验基础。方法：（1）利用基因重组技术分别克隆人UGT1A1野生型、G71R（211G→A）纯合突变型基因作为目的基因，将目的基因与pIRES2-EGFP载体质粒分别双酶切后连接，连接产物转化大肠杆菌DH5α，挑取阳性转化子进行PCR和基因测序分析，从而判断重组质粒是否构建成功。（2）设立UGT1A1野生型转染组、G71R纯合突变型转染组、空载体转染组、未转染组四组，利用脂质体介导转染于COS-7细胞，转染后在荧光显微镜下观察转染效率。（3）利用实时荧光定量PCR（RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）分别检测UGT1A1在COS-7细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达。结果：（1）PCR扩增UGT1A1野生型、G71R纯合突变型目的基因，琼脂糖凝胶电泳获得约1622bp大小的目的基因片段。（2）重组质粒进行基因测序鉴定，显示UGT1A1野生型重组质粒结果与UGT1A1mRNA（NM000463）的碱基序列完全相同，同源性为100%，G71R纯合突变型重组质粒与UGT1A1mRNA（NM000463）的碱基序列仅相差1个碱基（211G→A），与预期点突变结果完全一致，同源性为99%。（3）重组质粒及空载体质粒转染48小时后的COS-7细胞在荧光显微镜下可见显著绿色荧光标记，转染效率约为40%；未转染组的COS-7细胞未见绿色荧光标记。（4）野生型转染组和突变型转染组COS-7细胞UGT1A1的mRNA和蛋白相对表达量显著高于空载体转染组和未转染组（P＜0.05）；空载体转染组与未转染组间无明显差异（P＞0.05）。结论：（1）UGT1A1基因野生型、G71R纯合突变型重组质粒构建成功。（2）转染了UGT1A1基因野生型、G71R纯合突变型重组质粒的COS-7细胞能够表达UGT1A1。