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目的运用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)联用技术建立关黄柏(盐炒)及其退虚热代表类方大补阴丸、疗本滋肾丸、滋肾丸体外化学成分分析方法,客观表征类方中所含化学成分。在中药血清药物化学理论与研究方法的指导下,表征关黄柏(盐炒)、大补阴丸、疗本滋肾丸、滋肾丸口服给予健康雄性大鼠后的血中移行成分,分析关黄柏(盐炒)在大补阴丸等类方血中移行成分的变化,探究其与关黄柏发挥退虚热功效的相关性。方法应用UPLC-MS/MS联用技术,建立类方体外化学成分分析及口服后大鼠血中移行成分分析方法。在与体外样品的UPLC-MS/MS总离子流图进行比较分析的基础上,结合MassLynx软件及体内成分辨识技术,提取关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方含药血清UPLC-MS/MS总离子流图的血中移行成分,并对其进行多级质谱的鉴定,表征关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方化学成分和口服给予大鼠后血中移行成分。结果1.关黄柏(盐炒)及大补阴丸等类方体外成分分析关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方体外化学成分获得了良好的分离和灵敏的检测,全扫描UPLC-MS/MS数据的采集在24min内完成。通过对高低碰撞能质谱数据的解析,关黄柏(盐炒)共表征56个色谱峰;大补阴丸共表征了 101个色谱峰;疗本滋肾丸共表征了 87个色谱峰;滋肾丸共表征了 95个色谱峰。2.关黄柏(盐炒)及大补阴丸等类方体内成分分析利用关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方体外全成分分析中建立的分析方法,24分钟内完成了Wistar大鼠口服关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方后其含药血清UPLC-MS/MS总离子流图的采集,关黄柏(盐炒)及大补阴丸等类方主要血中移行成分均获得良好的分离。基于MS/MS质谱数据解析策略和体外化学成分信息,通过对含药血清、空白血清和体外样品色谱图中各峰的保留时间、高低碰撞能质谱数据的直观比较分析并结合MassLynx数据处理技术,关黄柏(盐炒)共表征29个血中移行成分;大补阴丸共表征了 39个血中移行成分;疗本滋肾丸共表征了 35个血中移行成分;滋肾丸共表征了 37个血中移行成分。结论综上所述,本文在中药血清药物化学理论及研究方法的指导下,通过运用UPLC-MS/MS联用技术,建立了关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方体外样品及血清样品的分析方法,结合Masslynx数据处理技术,表征了关黄柏(盐炒)及大补阴丸等含关黄柏系列类方体外化学成分及口服给予大鼠后的血中移行成分,首次分析了关黄柏在大补阴丸等类方中血中移行成分的变化规律,为诠释关黄柏在退虚热类方中的有效成分及新药创制奠定了研究基础。