背景和目的 原发性甲状旁腺机能亢进症(Primary hyperparathyroidism，PHPT)简称甲旁亢，是一种使病人虚弱、残废，甚至严重威胁病人生命的内分泌性疾病。全世界每年新增甲旁亢病例近100，000例，欧美国家的发病率在1.3％左右，如美国每年有16，000例甲旁亢病人需手术治疗。文献报道达百例以上文章不少，如Gaz等在1987年就发表了麻省总医院1200例甲旁亢的手术治疗效果。Hodback等在1995年报道了瑞典Salhgrin医院甲旁亢的手术就达896例之多，其在内分泌疾病中的发病率已仅次于糖尿病和甲状腺疾病，被列为第三位。而国内病例报道不多，近年来，我国有关甲旁亢和甲状旁腺瘤的文献中共报道760余例，说明我国甲旁亢的发病率比过去大幅度增加，不能再视为罕见病，而是一种常见病。从资料报道看，我国对PHPT的诊断存在不少问题，主要是术前确诊率低，延误了正确诊断和治疗时机。而PHPT在我国早期骨病型较多，常误为骨囊肿，骨肉瘤，骨畸形。但PHPT所致的心、肾、骨系统损害却是不可逆的，严重影响病人生存质量，更加证明了早期诊断的迫切性和重要性。因此，提高对本病的认识，掌握其临床特点，重视早期症状，生化异常及早期发现骨质改变对PHPT早期诊断，减少误诊至关重要。 PHPT主要X线征象为骨膜下骨吸收，扁骨或肋骨纤维囊状骨炎，晚期骨盆，四肢可发生变形，典型X线征象对诊断极有帮助。但骨骼丧失钙质30～50％才能在X线检查时发现骨质改变，而CT和MR检查与普通X线检查相比可更早期发现骨质改变，为甲旁亢的早期诊断，及时治疗提供重要的科学依据。目前，关于原发性甲旁亢甲状旁腺(简称甲旁腺)细胞增生与凋亡，国内外报道尚不多见，而关于甲旁亢骨病的CT、MR征象与病理基础的研究，国内外均未见报道。 本课题利用高磷饮食诱发甲状旁腺机能亢进，建立原发甲旁亢动物模型，探讨甲状旁腺细胞增生与凋亡，在原发性甲旁亢发病机制中的作用。对甲旁亢动物模型行CT、MR骨扫描，并与病理对照，研究甲旁亢骨病CT、MR征象及其病理基础，评价CT、MR扫描检测早期P川叮的准确性。测定甲旁亢模型的骨密度(Bone而ne耐density，BMD)，探讨甲状旁腺细胞增生与凋亡程度与骨密度的相关性，为评价甲旁亢的预后提供重要依据。材料与方法 一、原发性甲状旁腺机能亢进动物模型建立:选择健康成年中国白兔(4石个月龄)120只，体重2.0一skg，不分性别，随机分为两组，对照组和实验组各60只，根据喂养时间将对照组和实验组各分为第1一6个月组。在相同的温度与湿度条件下，对照组以正常饮食(C盯P，1:0 .7)喂养，实验组以高磷饮食(C盯P，1:7)喂养，分别在喂养前一周及喂养后第1，2，3，4，5和第6个月末时，经耳缘静脉采血，做血钙，血磷，甲状旁腺素(PTH)测定，同时进行普通X线、CT、MR检查，并在高磷饮食喂养后第1一3个月末，将对照组及实验组动物各10只处死，第4一6个月末分别处死剩余动物，对所有动物甲旁腺、肾及骨骼进行病理检查，观察甲旁腺增生情况及骨骼影像与病理特征。 二、cT、MR及病理对照:将对照组(56只)与实验组(54只)动物在麻、醉状态下做全身骨CT、MR扫描(包括颅骨、四肢骨、骨盆、脊柱)，分析其CT、MR表现，同时利用定量CT检测甲旁亢模型骨矿密度(BMD)进行骨密度测定，了解骨代谢情况。在动物死后作病理检查，分析其病理所见，二者对照，研究影像表现及病理基础。 三、甲状旁腺细胞增生与凋亡测定: 1.腺体标本取材:在动物死亡之后，立即取出动物的甲状腺及甲状旁腺复合体放人4%多聚甲醛中固定。 2.实验方法: l)甲旁腺细胞计数:标本置于4%多聚甲醛中固定24小时，常规石蜡‘包埋，切片厚度4卿，HE染色。光镜下证实甲旁腺是否增生，在病理图文分析系统下，每例随机选取四个区域，以400倍视野范围分别计算每个视野的甲旁腺腺体细胞数，取四个视野的平均值作为每例4加倍视野范围的甲旁腺腺体细胞数。 2)腺体PCNA和时一的表达:采用免疫组化学ABC法，检侧腺体PC-NA和Bd一表达(试剂购自博士德公司)，在光镜下计算阳性细胞比率，每例随机选择4个视野，结合现染色片，统计每张玻片腺体细胞总数及其阳性细胞数，然后计算出阳性细胞数(每11拟〕个腺体细胞中阳性细胞数)。 3)细胞凋亡定量检测:采用DNA片段末端标记法(TUNEL)，该方法特别适用于凋亡细胞较少的组织，步骤按试剂盒说明进行操作(试剂盒购自Boe城ger Mannheim公司)。光镜下观察阳性细胞，每例随机选择4个视野，结合IIE染色片，统计每张玻片腺体细胞总数及其阳性凋亡细胞数，然后计算出凋亡指数(每1000个腺体细胞中阳性凋亡细胞数)。 四、统计学分析 所有计量资料均采用又土s表示，采用t检验分析两组资料间有无显著性差异，以回归分析两组资料之间的关系。P<0.05或P<0.01时，有统计学意义，利用SPSS 1 1 .5软件进行统计学处理。结果 1.高磷饮食可成功建立原发性甲状旁腺机能亢进动物模型。整个实验过程中，实验组血PTH水平明显高于对照组(P<0 .05)。在前3个月时，血钙水