目的：探讨氨基糖苷类抗生素对近球肾小管上皮细胞Na+，K+-ATPase活性及其表达的影响，并比较第一代氨基糖苷类抗生素庆大霉素(Garamycin GM)和新一代氨基糖苷类抗生素奈替米星(Netromycin NTM)对近球肾小管上皮细胞Na+,K+-ATPase活性及其表达影响的差别。 方法：采用显微微分离法获得大鼠近球小管上皮细胞(proximal tubles epithelial cells，PTEC)并进行原代培养，以免疫细胞化学方法鉴定细胞类型。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的NTM与GM作用12h、24h及48h对PTEC增殖的影响，以确定合适的NTM与GM的实验浓度。然后分为：(1)正常对照组(NC组)；(2)低浓度NTM(0.6mmol/L)与GM组(0.6mmol/L)(3)中浓度GM(1.2 mmol/L)与NTM组(1.2 mmol/L)；(4)高浓度GM(1.8 mmol/L)与NTM组(1.8 mmol/L)；每组设8个复孔(n=8)，分别作用12h、24h、48h。液闪法测定PTEC Na+，K’-ATPase活性；实时荧光定量RT-PCR的方法测定Na+，K+-ATPase α1mRNA的表达进行相对定量分析。 结果：①培养48h后，低浓度GM组和NTM组PTEC的Na+，K+-ATPase活性及其α1亚单位mRNA的表达都分别显著低于对照组(p值都小于0.01)；低、中、高GM浓度与PTEC的Na+,K+-ATPase活性呈显著负相关(r=-0.811，p<0.01)，与Na+，K+-ATPase α1 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.744，p<0.01)；不同NTM浓度与PTEC的Na+，K+-ATPase活性呈显著负相关(r=-0.759，p<0.01)；与Na+，K+-ATPase α1mRNA的表达也呈显著负相关(r=-0.745，p<0.01)②以中浓度GM或NTM培养PTEC12h，Na+，K+-ATPase活性及其α1亚单位mRNA的表达即均显著低于对照组(p值都小于0.01)；以中浓度GM培养PTEC的时间(12h，24h,48h)与PTEC Na+，K+-ATPase活性呈显著负相关(r=-0.885，p<0.01)，与Na+，K+-ATPaseα1mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.944，p<0.01)；以中浓度NTM培养PTEC的时间与PTEC的Na+，K+-ATPase活性呈显著负相关(r=-0.914，p<0.01)，与Na+，K+-ATPase α1 mRNA的表达也呈显著负相关(r=-0.922，p<0.01)；③培养48h后，对低、中、高浓度GM与NTM的PTEC进行比较，GM组的Na+，K+-ATPase活性及其α1亚单位mRNA的表达都显著低于相同浓度的NTM组；以相同的中等摩尔浓度的GM或NTM分别与PTEC培养12h，24h，48h，每一个时间点上，GM组的Na+，K+-ATPase活性及其α1亚单位mRNA的表达都显著低于NTM组。 结论：氨基糖苷类抗生素GM和NTM能够抑制肾小管上皮细胞的Na+,K+-ATPase活性及其表达；GM对肾小管上皮细胞的Na+，K+-ATPase活性和对其表达的抑制作用都强于NTM；氨基糖苷类抗生素对肾小管上皮细胞的Na+，K+-ATPase活性和对其表达的抑制作用是这类抗生素的肾脏毒理机制之一。