多巴胺的电化学检测及其与生物大分子的相互作用研究

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多巴胺含量测定在生理功能研究,临床应用甚至食品安全方面都具有重要的意义。化学修饰电极作为化学/生物传感器的电化学技术具有制备简单、响应快速以及检测灵敏度高等特点,因而日益得到人们的重视。本文针对多巴胺的快速检测,在构建新型化学修饰电极的材料方面开展了一系列研究,取得了一些有价值的成果。本论文的主要研究工作如下:1、基于聚吡咯和碳纳米管导电特性,制备了钛铁试剂掺杂的聚吡咯和碳纳米管修饰的低阻抗单分子层膜修饰电极。这种层层组装形成的传感器能对多巴胺有灵敏的响应。在最优化条件下用方波伏安法检测多巴胺,该修饰电极检测线性范围为2.0×10-8 M至1×10-4 M,检测下限为(S/N= 3)为3×10-9 M。该修饰电极具备背景电流小,重现性好的特点,由于掺杂了负离子,对多巴胺的检测具有良好的抗干扰能力。2、以聚吡咯为连接剂,采用一步共沉积法制备了DNA-碳纳米管复合物/钛铁试剂修饰电极,用于在近生理pH条件下对多巴胺进行选择性检测。该修饰电极具备DNA的生物催化活性,聚吡咯,CNTs的导电性能,因此多巴胺检测的灵敏度大大提高了。该电极稳定性好,能够在pH 6.0至8.5之间检测多巴胺,其检测下限(S/N = 3)为5.0×10-10 (pH 7.0)。3、DNA功能化石墨烯修饰电极通过循环伏安还原氧化石墨烯溶胶和控制直流电压沉积DNA的方法制备。该修饰电极综合DNA好的生物催化活性和石墨烯优良的电化学性能,提高了检测多巴胺的灵敏度,表现了动力学线性范围宽,检测下线低(3 nM),重现性好,能较长时间保持稳定等优点。4、通过荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法研究多巴胺与牛血清蛋白的相互结合,得出了三个温度下的结合常数,热力学参数,淬灭速率常数,以及结合位点数。多巴胺淬灭牛血清蛋白的荧光是一个静态淬灭过程。多巴胺与牛血清蛋白的色氨酸残基和酪氨酸残基都有相互作用。疏水作用里和氢键都是多巴胺与牛血清蛋白复合物形成的主要作用。牛血清蛋白的结构也因此发生变化。
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