真武汤出自《伤寒论》,由附子、生姜、茯苓、白术、白芍组成,是为表证过汗伤阳、少阴病阳虚水泛病证而设的名方。后来在治疗各种阳虚阴盛、水气泛溢之证方面,疗效显著。主要有增强心肌收缩力,对缺血性心肌的血氧供应有改善作用,使尿量增多,使肌酐、尿素氮减少等的作用。根据临床的报道:用真武汤添加红花、丹参等,治疗充血性心力衰竭,与一起服用强心利尿的西药进行对照,结果显示该组方对心肾功能均有明显改善,对机体内环境如血液中钠离子、钾离子、氯离子、血浆渗透压、血糖、尿素氮、血液的pH值都无显著改变。这个组方对机体内环境干扰比较小。由于真武汤煎煮过程比较复杂,患者服用不方便,某制药公司将真武汤改剂型为胶囊。课题组按照《药品注册管理办法》新药技术要求,对真武胶囊做临床前药效学评价及安全性评价。本课题为该项目的内容之一——临床前药效学评价。目的：分别研究真武胶囊粉对地塞米松所致KM雄性小鼠肾阳虚模型的温阳作用；给大鼠腹腔注射同种动物肾皮质混悬液,复制主动型Heymann肾炎模型,给予不同剂量的真武胶囊粉,研究药物对主动型Heymann肾炎模型的作用并进行初步的机制探讨；给予SPF级SD大鼠不同剂量的真武胶囊粉,观察并测定给药后6h尿量,并测尿液中Na+、K+、Cl-的浓度,观察真武胶囊粉对大鼠的利尿作用,并进行初步的机理探讨。方法：1.真武胶囊粉对地塞米松所致KM雄性小鼠肾阳虚的温阳试验采用肌肉注射的方式给予地塞米松磷酸钠注射液复制肾阳虚模型,分析真武胶囊粉对该模型动物肛温,自主活动,游泳时间的影响,对白细胞(WBC),红细胞(RBC),环磷酸鸟苷(cGMP),环磷酸腺苷(cAMP)含量的影响。取垂体,肾上腺,生殖腺做病理切片,取肝脏,脾脏,胸腺测重量,计算脏器系数,来评价真武胶囊对阳虚的作用。2.真武胶囊对大鼠利尿的作用采用一次灌胃给予1%的盐水复制水负荷大鼠,分析不同浓度的真武胶囊混悬液对大鼠6小时尿量的影响,及对尿液中PH值及Na+、K+、Cl-的浓度的影响,来评价真武胶囊对大鼠的利尿作用。3.真武胶囊粉对主动型Heymann肾炎大鼠的治疗作用研究首先用大鼠肾脏与弗氏佐剂按文献方法制备肾皮质混悬液,然后将上述混悬物给大鼠腹腔注射,每两周一次,复制主动型Heymann’肾炎模型。待尿蛋白显示模型形成后,将造模成功的50只大鼠按体重随机法分为5组：模型对照组(0.05g CMC-Na/kg)、真武胶囊低剂量组(5g生药/kg)、真武胶囊中剂量组(10g生药/kg)、真武胶囊高剂量组(20g生药/kg)、阳性药物对照组(雷公藤11mg/kg),分别灌胃给予上述药物一个月。通过观察给药前后大鼠体重、一般状况、尿蛋白含量,腹主动脉取血测血清中肌酐和尿素氮、总蛋白、白蛋白的含量,解剖取肾脏并计算脏器系数并进行肾脏病理组织学检查,研究真武胶囊粉对主动型Heymann肾炎大鼠的治疗作用。结果：1.与溶媒对照组相比,模型对照组小鼠体重增长显著减慢,自主活动次数显著减少,负重游泳时间显著缩短,且血液中cAMP含量显著降低,而cGMP含量显著升高。和模型对照组相比,真武胶囊粉中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠体重增长差异显著,自主活动次数显著增加,负重游泳时间显著延长,且血液中cAMP含量显著升高,而cGMP含量显著降低,且和溶媒对照组相比无统计学差异；病理组织学检查表明阳性药物和中、高剂量真武胶囊粉能显著改善肾阳虚所致肾上腺、睾丸、脾脏、胸腺的病理状况和功能,提高小鼠的免疫功能。说明真武胶囊粉中、高剂量组和阳性药物对照组对地塞米松所致的肾阳虚有良好的温阳作用2.与溶媒对照组相比,阳性药物对照组及真武胶囊粉高、中剂量组总尿量均明显增加；阳性药物对照组在给药后3h、5h尿量出现明显增加；真武胶囊粉高剂量组在4h,5h,6h尿量均明显增加；真武胶囊粉中剂量组在给药后5h,6h尿量明显增加；真武胶囊粉高、中剂量组尿液中Na+总量明显增加,在1h时真武胶囊粉高、中剂量组及阳性药物对照组Na+含量明显增加；阳性药物对照组尿K+总量明显增加。阳性药物对照组在1h,2h尿K+含量明显增加,真武胶囊粉高剂量组在2h尿K+含量明显增加；各组动物在各个时间点及尿Cl-总量均未见明显改变。3.与正常对照组相比(即给药期的溶媒对照组),造模组大鼠尿蛋白显著升高,体重增长明显减慢,提示造模成功。给药中期,与模型对照组相比,真武胶囊粉高剂量组及阳性药物对照组尿蛋白水平显著降低(P<0.05)；给药一个月后,与模型对照组相比,真武胶囊粉高、中、低剂量组及阳性药物对照组尿蛋白水平均显著降低(P<0.01)；血清生化指标的检测结果显示,真武胶囊粉高剂量和阳性药物对照组血清肌酐水平显著降低(P<0.05),真武胶囊粉高、中、低剂量组及阳性药物对照组尿素氮水平均显著降低(P<0.01),真武胶囊粉高、中剂量组及阳性药物对照组总蛋白水平显著升高(P<0.05),真武胶囊粉高、中剂量组及阳性药物对照组白蛋白水平显著升高(P<0.05),各给药组的白/球比未见明显改变。病理结果显示,HE染色镜检发现,溶媒对照组大鼠肾组织无变性、坏死,无肾小球固缩、闭塞及肾小管扩张,组织间隙无水肿,无炎性细胞浸润。模型对照组肾脏大多数肾小球明显肿胀,肾小球毛细血管丛内细胞数明显增多,以内皮细胞增多为主,毛细血管壁明显增厚,肾小球固缩、闭塞,肾小管出现广泛性损伤,水肿、扩张或萎缩。阳性药物对照组、真武胶囊粉高剂量组肾脏病变明显改善,肾小球内皮细胞有不明显的增生,肾小管上皮细胞的混浊性肿胀有明显的减轻,没有肾小管的管腔狭窄情况,肾小球的病变数量减少显著。真武胶囊粉中、低剂量组对肾小球的病变也有改善,但效果不如阳性药物对照组和真武胶囊粉高剂量组。六氨银染色后镜检发现,溶媒对照组大鼠未见肾小球基底膜,模型对照组大量肾小球基底膜弥漫性增厚。阳性药物对照组、真武胶囊粉高剂量组肾小球基底膜未见或轻微增厚,中、低剂量组肾小球基底膜较阳性药物对照组、真武胶囊粉高剂量组厚,与模型对照组比较亦有改善。结论：真武胶囊粉中、高剂量组对地塞米松所致的肾阳虚有良好的温阳作用；对主动型Heymann肾炎大鼠有治疗作用,可明显改善肾功能,减轻基底膜增厚等病理改变,该作用未见明显剂量依赖性。真武胶囊粉高、中剂量组及金匮肾气丸组对水负荷SD大鼠均有利尿作用；真武汤胶囊粉的利尿作用较金匮肾气出现的晚,但是利尿作用更持久；真武胶囊粉的利尿作用可能是通过促进尿液中Na+的排泄来实现的