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体细胞胚发生对于百合种球繁殖、种质保存、遗传性状改良等方面具有重要意义。目前百合体细胞胚发生的研究主要集中在植物生长调节剂和不同培养基对体细胞胚诱导效果的影响,大部分研究只凭肉眼观察到的形态特征来判断是否属于体细胞胚,未进行组织细胞学验证,特别是对体细胞获得胚性能力这个关键阶段缺少必要的组织形态学研究,使得百合体细胞胚的形态建成研究受到限制。本试验利用细胞生物学技术,研究兰州百合(Lilium davidii var.unicor)和细叶百合(LiliumpumilumDC.Fisch)体细胞胚发生途径和起源方式,以期为明确百合体细胞胚发生机制奠定基础。试验结果如下:1.体细胞胚发生起源兰州百合和细叶百合体细胞胚起源均存在外起源和内起源两种方式,其中外起源方式所占的比例分别是91.45%和83.85%。胚性细胞均在诱导体细胞胚发生的第9 d以外起源方式开始分裂。外起源位置分为两种:表皮细胞和亚表皮细胞。兰州百合的内起源方式发生在诱导体细胞胚的第12 d,而细叶百合内起源发生时间为诱导体细胞胚的第15 d。两种百合体细胞胚发育过程中都存在导管细胞,均为多细胞起源发生方式。本试验中,体细胞胚均以间接途径发生,即先形成胚性愈伤组织,经脱分化再分化后形成体细胞胚,最终形成个体植株。2.体细胞胚发育过程中指示因子的差异两种百合胚性愈伤组织阶段的持续时间存在明显差异,细叶百合胚性愈伤组织持续时间长达42 d,而兰州百合仅为28 d。兰州百合在诱导体细胞胚的第9 d出现垂周分裂和平周分裂,而细叶百合出现垂周分裂和平周分裂时间为第15 d。体细胞胚发生过程中均发现表皮原细胞和维管束形成,兰州百合和细叶百合出现表皮原细胞时间分别为诱导体细胞胚的第24 d和第30 d,维管束形成分别是在鱼雷形胚时期和球形胚时期。兰州百合和细叶百合体细胞胚形成生理隔离的时间也存在差异,分别为诱导体细胞胚的第30 d 和第 33 d。3.体细胞胚发育过程中淀粉粒的变化在诱导体细胞胚培养9 d后,两种百合胚性细胞内充斥着大量淀粉粒,为淀粉粒积累第一次高峰期,在球形胚期出现第二次积累高峰,第三次积累高峰是在早期鱼雷形胚期,随着体细胞胚的发育逐渐减少。4.体细胞胚发生过程的导管细胞在体细胞胚发生过程中,发现在胚性细胞周围一直伴随着导管细胞的出现,并且在体细胞胚发育后期多个导管细胞基本形成一条直线。