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目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（N-acetyl-serine-aspartyllysine-proline,Ac-SDKP）是否通过调控热休克蛋白27（HSP27）激活FAS/FASL信号通路从而影响小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）和大鼠肺成纤维细胞的凋亡。方法体外培养两种细胞:MEF和大鼠肺成纤维细胞,分为四个组:1)对照组;2)TGF-β1诱导组（TGF-β1）;3)Ac-SDKP干预组（TGF-β1+Ac-SDKP）;4)J2干预组（TGF-β1+J2）。HE染色观察细胞形态变化,免疫细胞化学染色、免疫蛋白印迹（western blot）、免疫荧光染色和实时荧光定量PCR检测HSP27、FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3表达,流式细胞术和原位荧光检测观察细胞凋亡。结果1 HE染色结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导24 h和48 h的MEF细胞形态由多角形变为长梭形;TGF-β1诱导24 h和48 h的大鼠肺成纤维细胞形态向长梭形转变明显;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞形态向长梭形转变不明显。2免疫细胞化学染色结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导6 h、12 h、24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞胞浆HSP27棕黄色表达加深;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预12 h、24 h和48 h组,HSP27棕黄色表达变浅。与对照组相比,TGF-β1诱导6 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞胞浆FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3棕黄色表达加深,而TGF-β1诱导24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3棕黄色表达变浅;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预12 h、24 h和48 h组,胞浆FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3棕黄色表达加深。3 Western blot结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导6 h、12 h、24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞HSP27蛋白表达增多;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预12 h、24 h和48 h组,HSP27蛋白表达降低。与对照组相比,TGF-β1诱导6 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达增多,而TGF-β1诱导24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达降低;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预12 h、24 h和48 h组,FAS、FASL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达增多,以上结果差异均具有统计学意义。4实时荧光定量PCR结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞Hspb1（HSP27基因名称）的mRNA表达上调,Fas、Fasl的mRNA表达下调;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组,Hspb1的mRNA表达下调,Fas、Fasl的mRNA表达上调,以上结果差异具有统计学意义。5免疫荧光染色结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞胞浆HSP27红色蛋白荧光增强;FAS绿色蛋白荧光减弱;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞胞浆HSP27红色蛋白荧光减弱,FAS绿色蛋白荧光增强。6流式细胞术和原位荧光检测结果显示:与对照组相比,TGF-β1诱导24 h和48 h的MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞凋亡比例无明显差异;与TGF-β1诱导组相比,Ac-SDKP和J2干预组MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞凋亡趋势明显,差异具有统计学意义。结论Ac-SDKP与J2（HSP27抑制剂）作用相似,可以通过抑制HSP27表达,激活FAS/FASL凋亡通路,促进MEF细胞和大鼠肺成纤维细胞的凋亡。图 29 幅;表 14 个;参 79 篇。