超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）是一种广泛存在于生物体内的抗氧化酶,根据金属辅基类别可将其划分成四种:Mn-SOD、Cu,Zn-SOD、Fe-SOD、Ni-SOD。SOD能够将机体细胞代谢中形成的O2·、OH·、H2O2等进行有效清除,拮抗自由基对机体的氧化损伤。大量研究表明,SOD在抗炎、抗肿瘤、抗辐射及延缓衰老方面发挥重要作用,目前在医疗、日化、食品等行业领域得到广泛运用。我国是一个农业大国,生猪养殖及猪肉产量长期位于世界前列。标准化规模养殖和集中屠宰持续推进,带来大量猪副产物的处理问题,猪血即是其中之一。现阶段对猪血的综合利用和开发较少,基本以提取制备血粉、蛋白粉后用于动物饲料为主,附加值极低,因此大多屠宰产生的猪血被直接废弃,不仅造成资源浪费,也对周围环境产生影响。本学位论文通过对SOD性质的研究,从提高溶血处理效率、减少氯仿等毒性有机溶剂使用、提高精制纯化水平、降低生产成本等方面考虑,对传统提取纯化工艺进行改进优化,探索一条从来源丰富且成本低廉的猪血获得高纯度SOD的提取工艺路线,为国内屠宰业废弃血液的高值化应用提供新途径。该提取工艺通过酶法辅助超声溶血、铜锌盐热变性、丙酮沉淀、亲和层析精制四步得到比活力高达12553.47 U/mg的SOD,酶活回收率为73.63%、纯化倍数为160.22倍。采用单因素试验、正交试验及响应面试验设计对最佳工艺参数进行探索,其中酶法辅助溶血:酶添加量0.6%、酶解p H值8.0、酶解时间90 min;铜锌盐热变性:硫酸铜浓度1.74%、硫酸锌浓度1.59%、热变性时间15.54 min;丙酮沉淀:丙酮1倍体积。同时利用高效液相色谱、气相色谱、紫外吸收光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳等手段对提取成品的质量及稳定性进行评价。为弥补天然SOD稳定性及半衰期上的缺陷,采用季铵化壳聚糖对SOD进行化学修饰,确定较佳反应条件为:季铵化壳聚糖与SOD质量比1.5:1、修饰p H7.0、修饰时间6 h。该条件下,修饰率接近80%,酶活保留率77.63%,其在高温、强酸强碱及蛋白酶环境下的稳定性大幅提升。