目的：研究胆固醇诱导HUVECs中ROS升高引起的DNA损伤的机制：转录因子MCPIP是否介导?通过什么方式介导?以进一步认识脂代谢异常、DNA损伤与As关系。方法：1、培养并鉴定人脐静脉内皮细胞。2、Real-time PCR及Western blot检测胆固醇对HUVECs中MCPIP mRNA及蛋白表达的剂效、时效影响。3、用瞬时转染方法转染MCPIPsiRNA,沉默HUVEC中MCPP基因,Real-time PCR及Western blot检测MCPIPmRNA及蛋白水平以确定基因沉默效率。4、免疫荧光检测y-H2AX焦点形成；Western blot检测y-H2AX蛋白水平,确定细胞DNA损伤情况。5、单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤情况。6、流式细胞术检测细胞ROS的生成量。7、Western blot检测Nox4、p47phox的表达及膜上p47phox蛋白的表达情况。8、免疫组化检测As模型鼠胸主动脉γ-H2AX蛋白表达。结果：1、成功培养了人脐静脉内皮细胞,经免疫荧光鉴定证明该细胞株为人脐静脉内皮细胞株。2、不同剂量组胆固醇作用HUVECs24h后,结果显示胆固醇浓度≥6.25mg/L的各剂量组与对照组相比MCPIP RNA的转录升高,差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01)；12.5mg/L胆固醇作用不同时间发现MCPIP mRNA的表达量在2h之前有较低水平的波动,分别于0.5h及2h表达量最低,之后随时间的增加表达量逐渐增多,与对照组相比差异具有统计学意义(p<0.01)。MCPIP蛋白表达的剂效和时效关系与MCPIP mRNA的表达趋势基本一致。3、用瞬时转染方法将si-MCPIP转染HUVEC, MCPIPmRNA及蛋白水平沉默效率分别为73.4%(p<0.01)、41.1%(p<0.05)。4、免疫荧光检测结果显示胆固醇作用组yH2AX焦点形成的阳性细胞率和发生频率较对照组增加,si-MCPIP+胆固醇组结果较胆固醇作用组降低(p<0.01)。5、胆固醇作用组yH2AX水平增加,si-MCPIP+胆固醇组yH2AX水平与胆固醇作用组相比明显降低,差异具有统计学意义(p<0.05)。6、CASP分析单细胞凝胶电泳结果表明胆固醇作用组细胞TM值较对照组增加,si-MCPIP+胆固醇组细胞TM值减低,与胆固醇作用组相比差异具有统计学意义(p<0.01)。7、胆固醇作用组较对照组相比细胞ROS的生成量增加,si-MCPIP+胆固醇组细胞ROS的生成量与胆固醇作用组相比减少(p<0.05)。8、胆固醇作用组较对照组相比Nox4、p47phox的表达增高,膜上p47phox蛋白水平升高；si-MCPIP+胆固醇组Nox4、p47phox的表达降低(p<0.05),膜上p47phox蛋白水平减少,与胆固醇作用组相比差异具有统计学意义。9、免疫组化检测As模型鼠胸主动脉与正常喂饲的对照组比较,y-H2AX蛋白表达增加(p<0.01)。结论：1、胆固醇诱导了HUVECs中MCPIP的表达。2、MCPIP通过诱导Nox4和总p47phox的表达及p47phox膜转位引起ROS的产生,介导了胆固醇所致HUVECs中DNA损伤。