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目的研究细胞核增殖抗原Ki67、转录因子Klf4在结直肠腺癌组织中的表达与临床病理学意义及两者间关系,观察研究CD44+/C-myc+表型细胞在结直肠腺癌组织中的数量、分布特征、形态特征、病理学关系及其作为结直肠腺癌癌干细胞的价值意义,分析并探讨Ki67蛋白、Klf4蛋白、CD44+/C-myc+表型细胞三者与患者预后的关系。方法收集2007年3月-2012年9月中国人民解放军兰州军区兰州总医院病理科150例结直肠腺癌手术(术中均完整切除肿瘤)患者病例信息,调取患者癌组织石蜡包埋标本。另取腺瘤组织(部分伴有不典型增生)34例,距癌组织15cm以外正常组织10例作为对照。制作组织芯片,使用免疫组织化学染色、双重免疫荧光标记法及免疫组织化学双重染色,观察Ki67蛋白、Klf4蛋白在结直肠腺癌中的表达,探讨两者关系及与临床病理参数间的联系意义,观察CD44+/C-myc+表型细胞在癌组织中的数量分布、表达位置、形态大小,并探讨CD44+/C-myc+表型细胞作为结直肠腺癌癌干细胞临床意义,利用电话、门诊复诊等方式获取患者术后的生存信息,分析Ki67蛋白、Klf4蛋白、CD44+/C-myc+表型细胞与患者预后的关系。使用IBM SPSS19.0数据进行分析处理,P≤0.05表示差异具有统计学意义。结果1、不同组织中Ki67与Klf4的表达具有明显差异性(P<0.05)；同一组织中Ki67与Klf4的阳性表达程度呈负相关；Ki67的表达与浸润程度、病理分级呈正相关(P<0.05)；Klf4的表达与Ki67的表达、病理分级呈负相关(P<0.05)。2、正常肠黏膜中未见CD44+/C-myc+表型细胞(0/10),腺瘤组织中极少(5/34),腺癌中CD44+/C-myc+表型细胞数量明显增多(122/150),不同组织差异具有统计学意义(P<0.05)；双阳细胞数量与腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P值均小于0.05)；观察发现所有CD44+/C-myc+表型细胞的形态一致：胞核大呈卵圆形、均质深染,胞质较少,细胞特征与淋巴细胞相似,多分布于癌腺样组织中的基底部和共壁腺样组织的共壁处。3、将各个临床病理因素分别导入Cox模型中进行单因素分析发现：结直肠癌患者的总生存率、无进展生存率均与CD44+/C-myc+表型细胞的数量、淋巴结有无转移、Ducks分期有关(P值均小于0.05)。4、将各个病理参数导入Cox比例风险模型,使用“Forward:wald"计算方式进行多因素分析发现：患者的总生存率仅与组织中CD44+/C-myc+表型细胞的数量有关,与其他病理参数无关(P>0.05)；患者的无进展生存率与KLF4的表达、CD44+/C-myc+表型细胞的数量、Duks分期有关(P<0.05)。结论1、结直肠组织中Klf4可能发挥抑癌基因的作用。2、CD44+/C-myc+表型细胞很有可能为结直肠腺癌癌干细胞。3、Klf4的表达、淋巴结转移、CD44+/C-myc+表型细胞数量、Ducks分期影响患者的预后。