酸枣仁镇静催眠有效成分的研究

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本论文研究了应用大孔吸附树脂进行酸枣仁镇静催眠有效部位总生物碱的提取与精制,对其镇静催眠药效进行了实验。并以相同的药理活性指标为指导采用溶剂法分离出有效成分I及非活性成分X,应用UV、IR、MS、13C-NMR、化学反应、氨基酸自动分析等方法进行了结构鉴定,有效成分I为环肽类生物碱。 本实验考察了三种不同的总生物碱提取方法,确定采用酸水提取法。比较了树脂极性和比表面积对提取纯化效果的影响,筛选出非极性X-5型及中等极性AB-8型两种大孔吸附树脂,考察了不同浓度乙醇洗脱固体物量,并测定了UV吸收图谱。确定以70%乙醇为最佳洗脱溶剂,产率为1.25%。用溶剂法分离精致得到单体I和X,并通过药理实验确定单体I为镇静催眠的有效成分,产率为0.073%。 生物碱有效成分与Dragendorff’s试剂呈阳性反应以及酸水解液的氨基酸分析可以推断结构为含有亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸的环肽类生物碱。单体I的UV图谱在202nm和270nm处各有一个吸收峰。IR图谱具有3280cm-1(-NH),1660cm-1(C=0),1530cm-1(芳骨架),1240cm-1(苯醚)的特征吸收。13C-核磁共振光谱共给出27个碳的信号,显示有三个羰基碳(6171.786、170.822、167.023),另外在6113.814~157.476存在8个烯碳,其余16个碳δ值均在83.721~12.168之间。从EIMS给出分子离子峰为484,推导出单体I的分子式为C27H40N4O4。来自3-羟基脯氨酸的主要碎片离子峰m/e96和68,可以推断单体I为amphibine-B型分子结构的14元环肽生物碱,其中环参与氨基酸为异亮氨酸,末端氨基酸为亮氨酸。这是在酸枣仁中首次发现这个化合物。
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