肝癌是最常见的高致死性的恶性实体肿瘤疾病之一,其治疗一直是临床的重点和难点。由于肝癌具有严重的耐药特性,目前临床使用的化疗药物难以达到可期的治疗效果,且副作用明显。当肝癌病程进入晚期时,现有的治疗手段更是收效甚微。因此,寻找和开发新的治疗药物和手段,是提高肝癌临床治疗效果的关键。病毒基因工程药物作为有望大幅提高癌症治疗效果甚至攻克癌症的新型药物,进一步开发和发展此类药物,是突破肝癌临床治疗局限的重要方向之一。其中,以痘苗病毒为载体的抗肿瘤病毒基因工程药物,对肿瘤细胞具有明显的靶向性。所以,我们使用痘苗病毒构建了具有靶向抗肿瘤活性的新型病毒基因工程候选药物—IL-37-痘苗病毒（vaccinia virus expressing IL-37,VV-IL-37）。并且,进一步研究了 IL-37-痘苗病毒的抗肝癌作用和作用机制。通过这些研究,以期为肝癌提供潜在的高效治疗药物和新的治疗思路。目的:本研究旨在构建新型抗肿瘤病毒基因工程候选药物VV-IL-37,并阐明VV-IL-37在肝癌中的作用及其机制。方法:首先,应用病毒基因工程方法构建重组痘苗病毒VV-IL-37。然后,使用VV-IL-37感染工具细胞293细胞,免疫荧光法和QRT-PCR检测感染效果。接着,使用VV-IL-37 感染肝癌细胞 HepG2、HCCLM3、SMMC7721、Be17402,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清中IL-37的表达量,western blotting法检测细胞内IL-37的表达量,QRT-PCR检测细胞内IL-37 mRNA表达量。随后,采用Transwell法检测VV-IL-37感染的SMMC7721、Be17402细胞的迁移侵袭能力,MTT法检测细胞的增殖能力。进一步,采用western blotting法检测VV-IL-37感染的SMMC7721、Be17402细胞内p-STAT3和STAT3表达水平,以阐明VV-IL-37的作用机制。最后,应用C57BL/6小鼠成瘤实验检测VV-IL-37对肿瘤生长的影响,并且采用western blotting法检测了肿瘤组织内IL-37、p-STAT3和STAT3表达水平,ELISA法检测肿瘤组织内IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达水平。结果:1.免疫荧光法和QRT-PCR结果显示,VV-IL-37具有很强的感染能力,可使293细胞内IL-37 mRNA表达量大幅增加。2.MTT 法结果显示,VV-IL-37 感染肝癌细胞HepG2、HCCLM3、SMMC7721、Be17402后,四种细胞的活力均减弱,其中SMMC7721、Be17402细胞活力减弱最为显著。而且,ELISA法、western blotting法和QRT-PCR结果均表明,VV-IL-37可大幅增加SMMC7721、Be17402细胞中IL-37的表达量。3.Transwell法结果显示,VV-IL-37可明显减弱SMMC7721、Be17402细胞的迁移侵袭能力。4.western blotting 法结果显示,VV-IL-37 可明显减弱 SMMC7721、Be17402细胞中p-STAT3的表达水平。5.C57BL/6小鼠成瘤实验结果表明,VV-IL-37可明显抑制体内肿瘤生长。而且,western blotting法结果,VV-IL-37可明显增强肿瘤组织内IL-37的表达,而显著减弱p-STAT3的表达。不仅如此,ELISA结果显示,VV-IL-37可明显增强肿瘤组织内IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达水平。结论:VV-IL-37通过增强抗肿瘤免疫反应,进而抑制肝癌细胞SMMC7721、Be17402的增殖和迁移侵袭能力,最终阻止肝癌的恶性发展。