鸡球虫病和新城疫都是严重影响养禽业发展的疫病。若能通过构建载体,将新城疫病毒的F基因(即主要致病基因)通过电转化方法导入球虫体内,使其稳定表达F蛋白,同时激发宿主的体液免疫、细胞免疫、粘膜免疫,既预防了球虫病,同时又控制了新城疫,那么这个系统一经建立,就预示着重大禽病的多联疫苗新型生产与接种系统的诞生,为集约化养禽业提供了一个高效口服多价疫苗。 本研究通过单卵囊分离技术,获得了遗传相对一致的早熟柔嫩艾美耳球虫BJ125株,纯化后,提取球虫基因组DNA。用PCR克隆柔嫩艾美耳球虫微线-1的上、下游调控序列及微线-2的部分上游调控序列。构建pmic1-d2EYFP-N1载体(黄色荧光蛋白为报告基因),电击法对球虫卵囊进行瞬时转染,卵囊发光率为1.5%。但同时,也发现球虫在某些条件下有自发荧光的现象,因此,尚不能确定其转染效率。对鸡球虫未孢子化卵囊进行转染,免去了制备子孢子才能转染的繁琐低效的过程,将极大地推动鸡球虫转基因的研究和应用。