菜芙蓉花总黄酮的提取分离及活性研究

来源 :河北科技大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yinyilin183
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菜芙蓉(Hibiscus manihot L.),又名金花葵、黄蜀葵,为锦葵科(Malvaceae)秋葵属植物,国内栽培广泛,一年生或多年生植物,可全草入药。菜芙蓉的花中有多种生物活性物质,其中黄酮的含量高达6%。黄酮类化合物有很强的抗氧化活性,它在抗心脑缺血、缺氧,保护肝损伤以及增进人体代谢中的抗氧化功能等方面有显著效果,但迄今为止鲜见有关的菜芙蓉花黄酮活性的研究。本文以菜芙蓉花为原料,通过传统的有机溶剂提取法,用70%乙醇提取菜芙蓉花总黄酮;并以芦丁为标准品制作标准曲线,测定总黄酮的含量。用硅胶柱色谱对菜芙蓉花总黄酮进行分离,对菜芙蓉花提取物的抑菌活性及抗氧化活性进行研究。结果表明:以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cercus)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为实验菌种,通过滤纸片法测定发现,菜芙蓉花总黄酮对所选细菌的抑菌效果明显强于70%乙醇,对酵母菌等真菌没有抑菌作用。对4种供试细菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为:大肠杆菌0.25 mg/m L,蜡状芽孢杆菌0.25 mg/m L,金黄色葡萄球菌0.125 mg/m L,枯草芽孢杆菌0.125 mg/m L。以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为指示菌,从热处理﹑p H﹑紫外光三个方面考察菜芙蓉花提取物活性成分的稳定性研究,发现菜芙蓉花提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性,对紫外光也有极高的稳定性。菜芙蓉花提取物在酸性条件下抑菌活性强,在p H6-8之间变化最大,且p H>8之后只有微弱的抑菌活性。用70%乙醇为溶剂成功提取到菜芙蓉花总黄酮粗品,含量高达4.31%。以氯仿:甲醇(90:10-0:100)各1 L的洗脱液进行梯度洗脱将菜芙蓉花总黄酮分离,收集组分,根据黄酮化合物的紫外荧光显色反应,对收集组分用2%硝酸铝的醇溶液进行鉴别。结果表明:当洗脱剂为氯仿:甲醇80:20时,开始有黄酮类化合物洗出;当洗脱剂为氯仿:甲醇40:60时,洗出的黄酮类化合物逐渐减少。对菜芙蓉花乙醇提取物从清除羟自由基(·OH)、超氧自由基(O2一·)、DPPH自由基体系,以及总还原能力方面四个方面进行抗氧化性研究。实验表明,洗脱剂为氯仿:甲醇70:30的分离流分对(·OH)和DPPH自由基的清除效果以及总还原能力最强,当溶液浓度到达180 mg/L时,对羟自由基(·OH)清除率能达到71.3%,对DPPH自由基的清除率高达82.6%。洗脱剂为氯仿:甲醇80:20的分离组分对超氧自由基(O2一·)的清除作用尤其突出,当溶液浓度到达180 mg/L时,对超氧自由基(O2-·)的清除率达70.9%。
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