通过对8种不同种类弱阳离子交换色谱（WCX）填料对还原变性溶菌酶（Lys）复性的考察，选出了配基为3-硝基邻苯二甲酸酐柱为最佳复性的色谱柱，在此基础上，对WCX固定相对还原变性Lys折叠的贡献及其影响复性的各个条件进行研究。 全文包括四个部分： 1．文献综述：蛋白折叠的研究具有重大的理论意义和使用价值，液相色谱法（LC）是近年来发展最快的方法之一。本文仅对LC固定相对蛋白折叠的贡献以及二硫键折叠的研究进展进行了全面地综述。 2．为了减少不可逆吸附，在硅胶表面先键合了一层聚乙二醇（PEG），以使硅胶表面变成亲水性，然后再对其表面进行化学改性使其成为弱阳离子交换（WCX）介质。亲水性的增强能够减少和避免生物大分子的不可逆吸附，并且可以维持其足够高的生物活性回收率。为了比较PEG对蛋白质复性的影响，本文用键合了不同分子量PEG的PEG200、PEG400、PEG600、PEG1000四种柱子，分别比较了它们对还原变性Lys复性的影响。结果表明从对还原变性Lys复性以及柱子稳定性方面考虑，键合PEG400的柱子效果最好。 3．由于在WCX中，在弱的离子交换剂上配体结构或组成的稍微变化就会对蛋白折叠产生较大的影响。研究了四种不同配基（3-硝基邻苯二甲酸酐、丁二酸酐、邻苯二甲酸酐、苯基丁二酸酐）的弱阳离子交换色谱填料对还原变性的Lys复性效率的影响。结果表明配基为3-硝基邻苯二甲酸酐的WCX柱复性效果最好。指出一个新概念，活性回收率（RB）与质量回收率（RM）之比R_（B／M），通过实验检验，R_（B／M）可以很好的反映复性条件的好坏。 4．用WCX对还原变性Lys的复性进行了研究。考察了流动相中脲浓度及盐种类对用WCX对Lys复性的影响，结果表明当流动相中含有3.Omol.L一’的脉及l.Omol·L一’硫酸钱时能提高其生物活性回收率。在此wCX柱上，Lys的保留呈现离子交换和疏水双保留机理。发现在硅胶基质的wex柱上，当蛋白浓度为1 5.omg·mL一’到so.omg·mL一’时，用WCX折叠的复性产率均高于用稀释法的复性产率;在蛋白浓度为20.omg’mL一’时活性回收率达到最高，为95.4%。同时还考察了流动相组成、脉浓度、pH值、流速、温度和复性时间等对复性的影响。