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离子液体拥有许多独特的性质,如:几乎可以忽略的蒸汽压、超强的溶解能力、强大的可设计性以及可以与某些溶剂形成三相等,这些性质使得离子液体的应用范围不断扩大,主要涉及到的领域有:酶催化反应、萃取、有机合成等。本文利用亲油性离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐[Bmin]PF6,并借助混合表面活性剂形成了具有稳定中相的三液平衡体系。以离子液体、表面活性剂和盐的水溶液为三组分绘制了拟三元相图,研究形成三液平衡体系所需的各个组分的含量范围,结果表明在研究范围内存在较大区域的连续三相微乳液。利用拟三元相图,配制不同组成的三相微乳液,研究脂肪酶、底物以及产物等对其各相体积的影响,从而确定各相体积变化最小的三相微乳液为反应介质。在该介质中进行了脂肪酶催化水解4-硝基苯丁酸酯反应,并考察了反应条件对水解反应的影响,其中温度、pH、反应时间对酶活性有较大的影响,且在缓冲溶液的pH=8、温度为45℃时反应速率最大。在最优条件下,对三相微乳液与两相微乳液两个体系中的酶催化反应进行了动力学研究,根据米氏方程求得了两个体系中的Vmax和Km值。其中,三相体系的Vmax约是两相体系的5倍,充分体现了三相微乳液在酶促水解p-NPB反应方面的优越性。为了进一步阐述三相微乳液在酶催化方面的优势,考察了酶在其中的稳定性,发现培育72h后脂肪酶的残余活性仍能达到72%,远远高于两相微乳液。通过红外光谱分析得出洋葱伯克霍尔德菌脂肪酶在三相微乳液中的蛋白质酰胺Ⅰ带结构与水溶液中极其相近,这也就充分解释了其在三相微乳液中催化性能的显著。为了进一步探讨三相微乳液在酶催化领域的独特优越性,还以其为反应介质进行了酶催化手性拆分反应。以布洛芬为底物,皱褶假丝酵母菌为脂肪酶主要来源,采用酶促酯化的方法对其进行手性拆分。高效液相色谱建立了检测R-布洛芬、S-布洛芬及其酯的方法,其中R-布洛芬和S-布洛芬能够得到较好的分离,而布洛芬酯未能分离开。对两相微乳液和三相微乳液两个体系中酶法拆分反应进行了比较,三相微乳液中脂肪酶的对映体选择性和活性均高于两相微乳液体系,再一次体现了三相微乳液的优越性。此外,利用单因素法着重考察了醇种类、底物与醇摩尔比、底物浓度、酶浓度、盐浓度、温度以及总表面活性剂浓度等因素对酶促酯化反应的影响。结果表明,醇种类、底物与醇摩尔比、酶浓度等因素对反应有较大的影响。