目的:检测前列腺癌肿瘤干细胞中Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)的表达情况,通过对肿瘤干细胞、非干细胞进行YAP1相关基因修饰,观察其自我更新、增殖能力在体内及体外阶段的变化。进而探讨YAP1的表达对前列腺癌肿瘤干细胞的影响。方法:使用干细胞表面标记抗体CD133对前列腺癌肿瘤细胞进行标记,应用磁式分选(MACS)的方法将前列腺癌细胞系LNCa P及C42细胞进行细胞分类,筛选出肿瘤干细胞(即CD133阳性)和肿瘤非干细胞(即CD133阴性)。之后用western blot检测肿瘤干细胞、肿瘤非干细胞、常规肿瘤细胞中YAP1的表达情况。然后将CD133磁珠筛选的细胞进行进一步实验,我们用质粒进行稳定转染,将肿瘤干细胞进行YAP1敲除,将肿瘤非干细胞进行过表达YAP1,后行球形成试验、软胶克隆形成试验,观察基因修饰后的细胞的自我更新及增殖能力的改变。之后我们进行体内实验,将一定量的进行基因修饰过的两种细胞以及普通的肿瘤细胞分别进行体外预混,后将细胞注射的不同的裸鼠皮下。待成瘤后每隔7日进行小鼠皮下肿瘤直径测量,待肿瘤生长速度进入平台期后,收取标本进行免疫组化,观察与验证CD133、YAP1、Ki67、SOX2、OCT4等细胞标记物的检测。结果:1.CD133(+)LNCa P及C42细胞YAP1的表达分别高于CD133(-)LNCa P及C4-2细胞2.CD133(-)细胞行YAP1过表达后,比CD133(+)组行YAP1敲除的细胞,成球率及及克隆形成率升高。3.体内试验部分,行YAP1转染的CD133(-)细胞在裸鼠皮下的成瘤生长情况要明显由于常规的肿瘤细胞以及行YAP1敲除的CD133(+)细胞。4.肿瘤免疫组化结果YAP1过表达组的CD133、YAP1、Ki67、Sox2、Oct4等标记明显高于常规组以及YAP1敲除组。结论:YAP1蛋白的表达在前列腺癌肿瘤干细胞中较普通前列腺癌细胞增高,激活YAP1会增加非肿瘤细胞干细胞的自我更新能力,抑制YAP1的表达干细胞的自我更新能力明显降低。YAP1的激活很有可能促进非肿瘤干细胞向肿瘤干细胞的转化。YAP1的激活有望成为列腺癌的进展、转移的关键的分子机制。此外,YAP1有可能作为一种肿瘤标记物对判断预后有重要作用。在临床方面为探索治疗前列腺癌的进展提供了新的治疗靶点。