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高效液相色谱-共振瑞利散射(HPLC-RRS)方法集高效液相色谱的高选择性和共振瑞利散射的高灵敏度于一体,能更好地解决共振瑞利散射选择性不高的问题,进一步扩大共振瑞利散射和高效液相色谱的应用领域。HPLC-RRS具有突出的优势,即色谱信号的产生与被测物质的物理化学性质相关性不大,特别适合检测非荧光物质和没有紫外吸收的物质。主要研究了应用HPLC-RRS联用技术测定氟喹诺酮类抗生素、人体内的多巴胺和维生素C,以及应用RRS法测定维生素C。实验探究了最佳反应条件和影响因素,并对反应机理做了初步讨论及验证。本文包括绪言和正文两部分,其中绪言部分简单介绍了高效液相色谱仪和共振瑞利散射法,并概述了HPLC-RRS联用方法的基本原理、应用现状和应用前景。研究报告的主体部分主要包括以下三个实验体系。1.高效液相色谱与共振瑞利散射联用技术测定尿液中的氟喹诺酮类抗生素创建了一种可靠的高效液相色谱与共振瑞利散射联用方法,用于测定水和尿液中左氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种氟喹诺酮类抗生素。在pH 4.4～4.6的BR缓冲溶液中,被高效液相色谱仪分离后的氟喹诺酮类药物可以与赤藓红形成1：1的离子缔合物,从而引起共振瑞利散射信号的剧增。在λex=λem=330nm处记录共振瑞利散射信号。本文研究了氟喹诺酮类药物的共振瑞利散射的光谱特征及实验条件,包括pH、检测波长、赤藓红浓度、流速、反应管长等。应用量子化学计算、傅里叶变换红外光谱、紫外吸收光谱、扫描电子显微镜等讨论反应机理。样品的回收率在97.53%～102.00%之间,相对标准偏差低于4.64%。三种药物的检测限(S/N=3)为0.12～0.28μg·mL-1,线性回归系数都高于0.999。该方法己被证明为简单、消耗低、灵敏度高的分析方法。2.基于形成铁氰化锆纳米粒子的共振瑞利散射法测定维生素C在pH 2.55盐酸溶液中,维生素C可以将[Fe(CN)6]3-还原为[Fe(CN)6]4-[Fe(CN)6]4-继而和Zr(Ⅳ)反应生成Zr[Fe(CN)6]化合物,最后该化合物通过静电引力和范德华力聚集成{Zr[Fe(CN)6]}n纳米粒子。在340 nm处的共振瑞利散射信号与0.1～1.45μg·mL-1范围内的维生素C含量成正比。该方法的检测限(3s/k)低至0.128 ng·mL-1。文中研究了该体系的共振瑞利散射光谱特征、最适宜的反应条件、反应机理和以有机溶剂为主的影响因素。一个高灵敏度的、快速的、简单的共振瑞利散射方法已经被成功地应用于测定维生素C注射液和片剂中的维生素C。3.高效液相色谱与共振瑞利散射联用技术测定维生素C和多巴胺在pH 2.55的盐酸介质中,维生素C、多巴胺能够与[Fe(CN)6]3-和Zr(Ⅳ)经过一系列反应后形成{Zr[Fe(CN)6]}n纳米粒子,从而使得共振瑞利散射信号在340 nm处明显增强。基于此,创建了高效能的、选择性好的高效液相色谱与共振瑞利散射联用法测定人体尿液中的维生素C和多巴胺。文中研究了pH、探针浓度、流速等对反应体系的影响,应用了紫外吸收光谱和扫描电子显微镜进行反应机理的讨论。