基于碲化镉量子点探针的胃癌细胞株MGC80-3的体外免疫荧光成像研究

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目的:制作近红外靶向碲化镉(CdTe)量子点(Quantum Dots, QDs)探针对人胃癌细胞株MGC80-3进行特异性免疫荧光成像。方法:将人胃癌特异性抗原TAG-72(Tumor-associated Glycoprotein72)的单克隆抗体CC49与碲化镉量子点结合,制成具有特异性标记功能的靶向碲化镉量子点探针。采用透射电镜观察、荧光光谱分析以及高效液相色谱分析(HPLC)等方法对制成的样品特性进行研究分析。采用蛋白质印迹(Western Blot)和免疫组织化学法对细胞株表面的抗原TAG-72进行检测。采用直接免疫荧光法,通过靶向碲化镉量子点探针与胃癌表面抗原TAG-72的特异性结合对胃癌细胞进行免疫荧光成像。结果:透射电镜成像显示靶向量子点探针直径较量子点直径增加了仅约0.3nm。光谱分析显示靶向碲化镉量子点探针发射光光谱与未结合抗体的碲化镉量子点发射光光谱基本相同。高效液相色谱分析显示实验合成了的靶向碲化镉量子点探针溶液样品中含有两种物质,即靶向碲化镉量子点和少量游离的CC49单克隆抗体。Western Blot和免疫组织化学法检测显示人胃癌细胞株MGC80-3表面存在特异性抗原TAG-72,而正常胃粘膜上皮细胞株GES-1细胞表面未检测到抗原TAG-72。胃癌细胞免疫荧光成像显示实验中制作的靶向碲化镉量子点能够与胃癌细胞特异性结合并显像。结论:通过本项研究可以制作一种能够特异性结合胃癌细胞的靶向碲化镉量子点探针,在体外能够对胃癌细胞株进行特异性免疫荧光成像。
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