千层金精油的提取、成分分析、抗氧化及抗菌活性的研究

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千层金(Melaleuca bracteata),属于桃金娘科白千层属,为常绿乔木。千层金不仅具备有的较高的观赏价值和较强的适应能力,而且其叶片富含植物精油,香气浓郁,具有多种生物活性,在抗氧化、抗菌、抗虫等等方面展现出了很好的应用潜力。本试验选用福建地区的千层金作为原料,研究了千层金精油的提取工艺、成分分析、抗氧化活性以及抗菌活性。研究结果表明:1、采用有机溶剂萃取法提取千层金精油,探讨影响提取率的主要因素。结果表明,千层金精油的最佳提取工艺条件为:提取时间3h,提取温度50℃,料液比1:20,在此工艺条件下的精油提取得率4.51%。影响千层金精油提取率的主要因素主次顺序为:萃取时间>料液比>萃取温度。2、利用响应面法优化超声波辅助法提取千层金精油的工艺条件。在单因素试验的基础上选取超声功率、提取时间和料液比为影响因子,应用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,以提取精油率作为响应值,进行响应面分析。结果表明,超声波辅助提取千层金精油的最佳工艺条件为:超声功率389.5W,提取时间21min,料液比1:20。提取千层金精油得率的预测值为4.542%,验证值为4.536%。影响千层金精油提取率的主要因素主次顺序为料液比>超声时间>超声功率。3、采用顶空固相微萃取法、水蒸气蒸馏法、超临界CO2流体萃取法、超声波辅助萃取法和有机溶剂萃取法等方法获的的千层金挥发组分或精油进行GC-MS分析、鉴定和比较。采用HS-SPME提取的千层金挥发物质检测出76种,占总峰面积的97.28%;采用HD提取的千层金挥发物质检测出37种,占总峰面积的99.67%;采用SFE提取的千层金精油检测出61种物质,含量占峰面总面积的96.65%-采用UAE提取的千层金精油检测出42种物质,含量占峰面总面积的98.50%-采用有机溶剂萃取法提取的千层金精油检测出41种物质,含量占峰面总面积的96.72%。采用五种不同方法提取的千层金挥发主要物质包括了醚类、烃类、酯类、醇类、酚类、醛类等,其中醚类的所占的相对含量都最大,主要成分都为甲基丁香酚。4、采用了DPPH法、还原力测定以及ABTS法测定由水蒸气蒸馏法、超临界CO2流体萃取法、超声波辅助萃取法三种方法获得的千层金精油的抗氧化能力。试验结果表明:千层金精油具有较强的DPPH自由基清除能力,也具有一定的还原力和清除ABTS+自由基的能力,清除力随着精油浓度的增加而呈现上升趋势。5、以水蒸气蒸馏法提取出的千层金精油为样品,来研究其对铜绿假单胞菌、紫色杆菌、红色粘质沙雷氏菌、白色粘质沙雷氏菌和金黄色葡萄球菌这五种细菌的抑菌活性。采用滤纸片法测定千层金精油对五种供试细菌的抗菌能力,试验结果表明精油对紫色杆菌的抗菌效果最显著,且随着精油浓度的增加抑制圈直径越大,当精油浓度达到40mg·ml-1时,抑制圈直径达到18.53±0.60mm。此外,千层金精油对铜绿假单胞菌、红色粘质沙雷氏菌、白色粘质沙雷氏菌均有一定的抑菌活性。采用肉汤微量稀释法测定MIC和MBC的试验结果表明千层金精油对紫色杆菌的抑菌和杀菌能力最强,其MIC为2.5mg·ml-1, MBC为5mg·ml-1。千层金精油对铜绿假单胞菌、红色粘质沙雷氏菌、白色粘质沙雷氏菌的抑菌和杀菌能力相当,其MIC都为5mg·ml-1,MBC都为10mg·ml-1。千层金精油对金黄色葡萄球菌的MIC为5mg·ml-1,MBC为20mg·ml-1。
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