分子印迹技术是一种分离技术,是在模板分子周围形成网状聚合物,经模板洗脱,在聚合物内部就得到了与模板分子大小、形状、官能团互补的空穴,此聚合物能对模板分子进行特异性结合,小分子的印迹已经能达到良好的分离效果。对于模板分子是蛋白质来说,制备的蛋白质印迹聚合物价格低廉且能重复利用,并且对模板蛋白质具有良好的识别性能,有望成为构筑蛋白质分离材料最有用的方式,故蛋白质印迹技术得到了广泛研究。但由于蛋白质本身体积较大,构象复杂等特点,使得蛋白质印迹技术面临诸多挑战,比如大体积的蛋白质在聚合物结构内部的传质阻力较大,在水相中蛋白质与单体之间作用力薄弱,使得对蛋白质的印迹性能有待提高。故我们针对此问题从以下两方面进行了研究。一方面,我们结合了纳米粒子表面印迹、配位单体为功能单体及水相沉淀聚合构筑可逆物理交联等方法,对表面有组氨酸的蛋白质进行了印迹。采用表面有组氨酸的溶菌酶作为模板,以蒸馏沉淀聚合方式修饰有丙烯酰胺和双键的二氧化硅纳米粒子为载体球,以配位单体为功能单体,温敏单体为主单体,采用高于体积相转变温度(VPTT)即37℃为反应温度,制备了聚合物粒子。印迹聚合物层表现出了明显的温敏性,并利用在4℃即聚合物处于膨胀亲水状态进行模板洗脱。此印迹纳米粒子对模板溶菌酶表现出了优良的特异选择性,得到的印迹因子为22.7,在报道过的研究中算最高的,特异吸附容量达到了67.3 mg/g。而且,此方法同样适用于表面有组氨酸的血红蛋白,也表现出了良好的印迹性能。另一方面,我们采用二氧化硅纳米载体球通过配位作用预富集模板,水相沉淀聚合制备了印迹溶菌酶纳米粒子。采用表面修饰足够配位单体及双键的二氧化硅纳米粒子预富集模板溶菌酶,使得溶菌酶可以大量并规整的排列在载体表面,之后采用37℃为反应温度,水相沉淀聚合法制备了表面印迹纳米粒子。通过对比修饰不同基团的纳米粒子为载体,得出以配位作用预富集模板的优越性,特异吸附容量达到105 mg/g,远远高于上一研究的67.3 mg/g,说明通过预富集模板可以有效提高特异吸附容量,同时,在10 min时就可以达到吸附平衡,这是因为预先修饰在载体表面的功能单体量足够多使得亲和性增强,加快了吸附速率。