【摘 要】
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在细菌界中,不乏一些对人类有害的细菌,例如一些致病菌,这些有害细菌给人类的生产生活带来了许多危害,因此人类总是期望通过各种方法抑制其生长;同时,对于一些对人类有益的细
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在细菌界中,不乏一些对人类有害的细菌,例如一些致病菌,这些有害细菌给人类的生产生活带来了许多危害,因此人类总是期望通过各种方法抑制其生长;同时,对于一些对人类有益的细菌,例如肠道益生菌,人类以期通过某种途径促进其大量生长繁殖。细胞分裂是控制细菌生长与繁殖的基本生理过程。近年来,研究人员发现,细菌细胞分裂受分裂蛋白复合体的调控。本论文以细胞分裂蛋白复合体蛋白组分中FtsQ、FtsB与FtsL三个蛋白为研究对象,通过实验技术手段检测三者的相互作用关系以及确定三者结合形成的复合体的摩尔比,从实验结果可知,FtsB蛋白与FtsQ蛋白能够相互作用;FtsL蛋白与FtsQ蛋白不能够直接相互作用。在FtsB蛋白、FtsL蛋白以及FtsQ蛋白均存在的情况下,FtsB、FtsL与FtsQ三者之间存在相互作用关系,三者结合形成FtsQ/B/L蛋白复合体,且FtsQ/B/L蛋白复合体有摩尔比为1:1:1的三聚体和摩尔比为2:2:2的六聚体两种形态。通过本论文此部分对于FtsQ、FtsB与FtsL蛋白相互作用关系的初探,让我们对三个蛋白在细菌体内的结合情况有了初步了解。但是,想要彻底明白三个蛋白的具体互作模式以及互作关键位点还需依靠结构生物学的实验技术手段。另外,本论文试图通过CRISPR/Cas9基因编辑技术将蛋白标签敲入至FtsB的基因组序列中,以期利用Co-IP技术拉出一些FtsB蛋白的伴侣蛋白,从而发现新的细菌分裂蛋白复合体组分。本论文实现了对大肠杆菌ftsB基因的HA序列敲入,初步探究了 pCas-pTargetT双质粒基因编辑技术在大肠杆菌中的应用,而新的FtsB伴侣蛋白的发现还需依赖于后续实验来完成。
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