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木霉菌(Trichodermaspp.)在自然界中广泛存在,并被人们所大量研究。木霉菌通过拮抗作用、竞争作用以及重寄生作用等,对常见的多种病原真菌能够产生抑制效果,具有良好的生防应用前景。本研究在前期工作中从大蒜中分离筛选获得一株产木霉素(单端孢霉烯类化合物的一种)的内生真菌0248,后经形态、生理生化和分子序列分析鉴定为脐孢木霉菌(T.brevicompactum)0248。在优化脐孢木霉菌产木霉素的过程中,我们采用了8种不同碳氮源组合的培养基分别进行培养。结果表明,有两种培养基中脐孢木霉生长状况接近,但木霉素的产量差异明显。根据这一结果,我们对不同产素状态下的脐孢木霉进行了转录组和数字基因表达谱测序分析,根据测序结果筛选出tri5基因和Unigene8037两个目的基因,通过PCR克隆得到目的基因片段,并运用实时荧光定量PCR技术对这两个基因进行相对表达量的差异分析。同时采用RNAi技术,降低tri5基因的表达量,观察检测脐孢木霉转化菌生理生化、木霉素产量以及tri5基因表达量等的变化,进一步验证tri5基因的功能。实验结果表明在相同培养时间下,tri5基因和Unigene8037在不同产素状态间的表达量差异显著。在培养96h时tri5基因在两种培养基中均达到最大值,其中产素状态下的表达量是不产素状态下的107.18倍。通过检测产素培养基中tri5基因表达量与木霉素含量的变化,结果显示单位质量的菌丝体产木霉素的量随着tri5基因表达量的增加而不断增加,在培养96h时达到最大值31.25mg·g-1。Unigene8037的表达量在两种培养基中均随着培养时间的增加呈现上升趋势,产素培养基B中Unigene8037的表达量最大值为不产素培养基A中最大值的8.73倍。推测tri5基因和Unigene8037的表达与木霉素合成相关。利用试剂盒体外合成dsRNA,电击转化转染dsRNA进入脐孢木霉细胞内,并采用表型观察、实时荧光定量PCR检测tri5基因表达量的变化以及气相色谱法检测发酵液中木霉素的含量等多种检测方法,验证脐孢木霉菌中tri5基因的功能。实验结果显示,在电击条件为800V时,实验组与对照组的脐孢木霉菌相比,菌丝形态发生变化最为明显,单位质量菌丝体产木霉素的量下降幅度最大,从对照组的40.22mg·g-1下降为27.07mg·g-1;tri5基因表达量为对照的0.25。进一步验证了tri5基因在木霉素合成途径中具有重要作用。