腺疫(Strangles)是由马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies equi,S.euqi)引起的马属动物的急性上呼吸道传染病,是公认的世界范围内最常见的马属动物的传染病之一。本病以急性发热、咽炎、精神沉郁、头颈部淋巴结肿胀和破溃、流脓性鼻液为主要特征。由于该病传染性极强,对幼驹的伤害大,且一旦感染,很难将病原体彻底清除的特点,给养马业造成了巨大的经济损失。近年来,随着市场需求的拉动以及一系列精准扶贫政策的支持,全国各地驴产业发展迅速,养殖规模不断扩大,养殖模式由原来的粗放型快速向高密度的集约化迈进。然而,集约化养殖模式提升经济效益的同时,由于养殖密度的增大和生物安全防控措施的缺失,使得疫病呈现多发态势,成为当前阻碍驴产业健康发展的主要问题之一。2018年以来,山东、河南、河北、辽宁、山西、陕西、内蒙、甘肃、新疆等地的驴规模化养殖场先后暴发了腺疫疫情,给当地的养驴业造成了较大的经济损失。自腺疫被首次报道以来,科学界对腺疫的研究一直以来多集中在马上,对驴(尤其是集约化养殖模式的驴)发生腺疫以及驴源S.equi的研究较少。规模化养殖模式下驴群感染S.equi的易感年龄、发病率和死亡率、传播方式、病原的分子生物学特征、以及临床防治等方面的研究尚属空白,致使当前规模化驴场的腺疫防控缺乏科研数据支撑。因此,本课题针对上述问题进行了科学研究。首先选取了暴发腺疫的6家规模化养殖场(两家繁育场和4家育肥场)作为研究对象,通过临床诊断、染色镜检、细菌分离和PCR诊断等确认疫情是由S.equi引起的腺疫。统计分析显示,6家规模化驴场腺疫的总发病率为13.4%(291/2173),其中,1岁以下的驴驹发病率为40.3%(83/206),1岁至2岁驴的发病率为12.5%(191/1525),2岁以上驴驹的发病率为3.8%(17/442)。一岁以内幼驹的发病率显著高于1岁以上的驴(P<0.00001)。且1岁以内的驴驹因腺疫造成的死亡率为13%(11/83),但1岁以上的驴无死亡(P<0.0001)。该结果表明在规模化驴场中,1岁以下的驴驹最容易发生腺疫,且死亡率高。随着年龄的增大,发病率和死亡率均降低。此外,马的腺疫通常情况下多发于春季和秋季,以当年的九月至来年的三四月份最为多发,但此次规模化驴场的腺疫疫情开始于2018年的7月并一直延续至2019年8月份,这可能是由于集约化养殖模式下驴的生活方式和生活状态与以前役用的散养状态相比发生较大的改变,使得规模化驴场腺疫的发生不再有季节性。2018年7月至2019年8月期间,从山东、河南、河北、辽宁、山西、陕西、内蒙古、甘肃和新疆9省区暴发腺疫的49家规模化养驴场的667份病料中,鉴定到了SeM-136、SeM-138、SeM-142、SeM-144、SeM-145、SeM-146和SeM-149共7个新的S.equi基因型,且未检测到已知基因型的S.equi菌株。在鉴定到的新基因型中,SeM-136型菌株遍及除陕西以外的规模化养驴场的主要省区。所跟踪的49家暴发腺疫的规模化驴场中有37家均分离到了SeM-136型的S.equi菌株,而且这37家规模化驴场在腺疫大流行期间均有引种记录,而其他驴源基因型呈现一定的地域性,且发病规模较小,说明SeM-136基因型主导了这次大流行。使用SeM蛋白N端多变区所对应的327bp的核苷酸序列进行遗传进化分析发现,所有驴源S.equi分离株均与已知的马源分离株保持着较远的遗传距离,但驴源S.equi分离株之间距离很近,形成一个鲜明的分支,独立于马源分离株之外。说明引发本次疫情的S.equi菌株可能并非来源于马,而是一直存在于驴群中。此外,通过对SeM-138基因型分离株的相关研究直接证明了规模化繁育场的引种可以将致病菌株引入场内,说明了规模化养驴场建立引种隔离区的重要性。临床上对驴腺疫的治疗,目前仍存在着很多争论。本课题通过对2018年7月至2019年8月期间从9个省区分离到的7个基因型共133株S.equi菌株进行了青霉素和头孢噻呋钠的药敏试验,结果显示:133株S.equi分离株中未见耐药株出现,青霉素的抑菌圈范围为31-37mm,头孢噻呋钠的抑菌圈范围为30-35mm,均判定为敏感。同时,对随机挑选的12-14月龄颌下淋巴结肿大的驴进行抗生素治疗试验发现,不进行任何治疗的对照组,从淋巴结开始肿大至变软成熟所需的时间为6-13d,而连续注射7d青霉素的治疗组所需时间10-92d。治疗组所需时间显著长于对照组(P<0.01)。说明对已经出现淋巴结肿大的驴进行抗生素治疗会明显延长其病程。在此基础上,结合一年来的临床经验,初步制定了规模化驴场生物安全防控策略、治疗原则及治疗方法,以期对规模化驴场腺疫的防控和治疗提供帮助。综上所述,本课题从规模化养驴场暴发腺疫的实际问题出发,对集约化养殖模式下腺疫的发病特点、传播方式、致病菌株的分子生物学特征、临床常用药物的敏感性、生物安全防控策略、治疗原则及治疗方法等多方面进行了研究。为当前规模化驴场的腺疫防控供参考依据,同时也为其他传染病的防控提供借鉴。