siRNA沉默FGFR3基因表达对肺癌SPC-A-1BM细胞致裸鼠骨转移的影响的研究

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ana504
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探究成纤维细胞生长因子受体3(Fibroblast Growth Factor Receptor-3,FGFR3)基因的沉默对高骨转移性人肺腺癌SPC-A-1BM细胞的影响及其对裸鼠骨转移的影响。方法:本实验共分为3个组:其中1组设置为实验组(FGFR3特异性siRNA干扰组),2组设置为阴性对照组(FGFR3非特异性阴性对照siRNA干扰组),3组设置为空白对照组(无siRNA干扰组)。通过核酸转染试剂脂质体LipofectamineTM2000(Lipo2000)介导siRNA转染高骨转移性人肺腺癌细胞株(SPC-A-1BM细胞株);实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)用于检测转染后FGFR3基因的m RNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western-Blot)用于检测转染前后FGFR3基因的蛋白表达水平;通过裸鼠尾静脉注射法进行建模,对各组裸鼠分别注射转染后的肺癌SPC-A-1BM细胞;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色法)用于制作裸鼠部分组织病理切片染色,明确各组裸鼠的肺癌SPC-A-1BM细胞骨转移的病理诊断,并进行区分对比各组骨转移的情况。结果:利用Lipo2000作为载体进行转染的各组siRNA对肺腺癌SPC-A-1BM细胞的转染效率可达约70%以上;Real-time PCR实验显示,实验组1组的FGFR3基因的表达被明显抑制,抑制率约为71%,和阴性对照组2组与空白对照组3组的FGFR3基因的表达量相对比,可见到明显的下调,利用单因素方差分析,差异有统计学意义(P<0.01);Western-Blot实验显示,对于FGFR3蛋白,实验组1组相对比阴性对照组2组和空白对照组3组的蛋白表达量明显减少,各组条带灰度值之间差异有统计学意义(P<0.01);各组裸鼠通过尾静脉注射法建模后,通过阴性对照组2组和空白对照组3组可以看出,约有50%-60%的裸鼠可见到不同程度的骨转移;经组织解剖取病理、制作蜡块、切片并进行HE染色实验显示,实验组1组相比较阴性对照组2组与空白对照组3组的裸鼠,发生肺癌骨转移的裸鼠数量及裸鼠骨转移的部位均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:利用Lipo2000作为载体介导的siRNA技术转染SPC-A-1BM细胞沉默FGFR3基因可明显抑制肺癌细胞的侵袭能力,并能减少骨转移的发生及发展;本实验为针对FGFR3基因沉默的骨转移瘤治疗方法提供了理论依据,为肺癌骨转移的治疗提供了新的治疗靶点。
其他文献
1 事故基本情况某35kV变电站控制室发出音响告警信号,随着后台机出现接地信号,10kV母线L3相电压突然降为零,L1,L2相电压升高,达到10.2kV,并且三相电压值出现大范围的波动。事故造成
随着现代信息技术的不断发展,人类社会早已步入信息社会,教育方向的转变导致教师的角色也在不停变化,为了适应信息化社会的要求教师必须具备专业的教育技术素质当前世界各国的教
目的:建立一种适用于实验室高通量测定动物脑脊液和血清中苯巴比妥纳药物浓度的方法.方法:通过测定各反应物的吸收光谱,确定荷移反应络合物的波长,并使用该波长分别测定苯巴
<正> 本文讨论的副词“在”指表进行或持续意义的,不涉及“正”和“正在”。“在”要跟动词性词语或形容词性词语构成一个结构体,例如“在哭”、“在大起来”。为行文方便,们
本文通过问卷调查,了解留学生对汉语新词语的知晓状况,并分析与之相关的语言学、社会学因素。调查结果表明,留学生对新词语的知晓状况处于较低水平,他们更倾向于掌握实用性、
索绪尔曾经提出语言符号有任意性和线条性两个重要特性。自然语言处理的发展,使我们对于语言符号的这些特性的认识和理解更为丰富、更为深刻了。这是自然语言处理对传统的理
为了验证受损河岸的生态修复效果,以修复近10年的河岸生态修复工程为研究对象,通过实测地上植物群落、土壤生物群落及近水区的结构与功能的演变过程,跟踪评价了河岸生态修复效果
作为斯德哥尔摩公约新增列名单中的一类化合物,短链氯化石蜡(short chainchlorinated paraffins, SCCPs)因其与已知的持久性有机污染物的相似性质而引起了国际社会的广泛关注。
以绢计赃,是指将绢作为一种货币手段用于国家法律中对赃罪的评定与计算。东汉始出现以绢赎罪,晋南北朝出现以绢计赃。其后一千余年中,由最初的以绢计赃,到钱绢并用。它的出现
Fe-Al金属间化合物具有优异的抗高温氧化和耐腐蚀性能以及密度低、比强度高等优点,利用热浸镀铝(HDA)表面改性方法在钢铁表面制得Fe-Al金属间化合物镀层,可以拓展和完善钢铁材