猪传染性胃肠炎病毒S和N蛋白三个抗原位点的原核表达及其免疫原性的研究

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猪传染性胃肠炎(Transmissible Gastroenteritis, TGE)是由冠状病毒科、冠状病毒属的猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus,TGEV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病,临床症状主要表现为呕吐、严重水样腹泻和大量脱水,是一种在全世界范围内流行的疫病。现在大多数国家主要通过弱毒疫苗对猪免疫接种的方法以防治该病,但是常规的疫苗免疫具有许多无法克服的缺点,例如:疫苗制备成本高、疫苗有毒性安全性不好、容易返祖等。所以目前世界上很多国家的专家都在致力于基因工程疫苗的试验研究。  本研究将TGEV的S蛋白的A、D抗原位点基因和N蛋白的N321抗原位点基因用两个柔性的Linker((GGGGS)3)连接起来,并命名为SLN基因送往生物公司合成;将SLN基因与pMG36e连接构建重组质粒,电转化至乳酸乳球菌。经过乳酸乳球菌对目的蛋白的表达后,Western-blotting检测结果表明目的蛋白具有良好的反应原性。将重组乳酸乳球菌细胞悬液口服免疫兔子3次,用初步建立的间接ELISA方法检测IgG和IgA的动态水平变化。最终试验结果显示,重组目的蛋白可以在兔子体内诱导发生特异性的体液免疫反应和粘膜免疫反应,表明此目的蛋白具有很好的免疫原性,说明S和N蛋白的这三个抗原位点非常有潜力应用于TGEV基因工程口服疫苗的研制方向。
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