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背景与目的:胰腺导管腺癌(pancreaticductaladenocarcinoma,PDAC)是较为致命的癌症之一,总体5年存活率不到5%。该病通常诊断为晚期,治疗手段有限。与其他肿瘤相比,PDAC促纤维结缔组织增生的改变更为明显,对传统化疗表现出明显的耐药性,并具有高度免疫抑制的肿瘤微环境。成纤维细胞活化蛋白-1(Fibroblastactivatedprotein,FAP-1)是一种促进肿瘤生长的蛋白,在许多人上皮性肿瘤的癌相关成纤维细胞中过表达,可导致致瘤性增加,肿瘤进展增强。MicroRNA-30a-5p(MicroRNA-30a-5p,miR-30a-5p)为抑癌基因,抑制PDAC细胞的增殖、细胞周期和促进癌细胞凋亡,增加PDAC细胞对化疗药的敏感性。本研究通过体外实验探讨miR-30a-5p/FAP-1在PDAC和胰腺正常细胞系中的表达和临床意义,过表达/抑制miR-30a-5p后是否靶向调控FAP-1的表达及对PDAC细胞增殖、迁移的影响,为胰腺导管腺癌研发新的靶向药物、提供新的理论依据。方法:1.反转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测miR-30a-5p在PDAC细胞系PANC-1、BxPC-3、Aspc-1、Miapaca-2以及胰腺正常细胞系HPDE6-C7中的表达水平,选出miR-30a-5p表达量较低,较高的两株细胞系,以确定转染细胞株。2.蛋白免疫印迹(Westernblot,WB)检测FAP-1在PDAC细胞系PANC-1、BxPC-3以及胰腺正常细胞系HPDE6-C7中的表达水平。3.生物信息学分析:基于在线TCGA(ThecancerGenomeAtlas,TCGA)数据库,提取PDAC患者FAP-1、miR-30a-5p的表达数据及临床病理结果。4.经TargetScansHuman7.2检测,miR-30a-5p与FAP-1基因是否存在结合位点。5.采用LipofectamineRNAiMAXReagent将miR-30a-5p模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)及其阴性对照序列(NC)分别转染PDAC细胞系BxPC-3、PANC-1。6.RT-PCR检测miR-30a-5p在两株PDAC细胞系中的转染效率。7.过表达/抑制miR-30a-5p后用WB检测细胞系BxPC-3、PANC-1中FAP-1的蛋白表达水平。8.CCK8实验、划痕实验、Transwell小室迁移实验验证过表达/抑制miR-30a-5p后对PDAC细胞增殖,迁移的影响。结果:1.miR-30a-5p/FAP-1在PDAC和胰腺正常细胞系中的表达和临床意义RT-PCR检测结果示:PDAC细胞系PANC-1、BxPC-3中miR-30a-5p的表达量显著低于胰腺正常细胞系HPDE6-C7(P=0.0034;P=0.0002),在BxPC-3细胞系中的表达量最低。Westernblot结果示:PDAC细胞系PANC-1、BxPC-3中FAP-1的表达量显著高于胰腺正常细胞系HPDE6-C7(P=0.0303;P=0.00030),在BxPC-3细胞系中的表达量最高。基于TCGA数据库得出的临床相关结果:FAP-1在肿瘤组织的表达量高于胰腺正常组织(P