【摘 要】
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研究目的探讨铁酸锌磁性纳米颗粒（ZFNPs）对肾癌细胞（Caki-1）的杀伤效应及其与活性氧（ROS）和自噬的相关性。研究方法采用水相法合成ZFNPs,使用透射电子显微镜（TEM）等方法对ZFNPs进行表征测试。MTT法检测ZFNPs对Caki-1细胞的生长抑制作用。2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠（DCFH-DA）染色检测不同处理组细胞内ROS水平。TEM观察ZFNPs能否诱导Caki-1细胞
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（编号:82072055）； 安徽高校自然科学研究重点项目（编号:KJ2019A0278）； 安徽省转化医学研究院A类基金（编号:2017zhyx02）；
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研究目的探讨铁酸锌磁性纳米颗粒（ZFNPs）对肾癌细胞（Caki-1）的杀伤效应及其与活性氧（ROS）和自噬的相关性。研究方法采用水相法合成ZFNPs,使用透射电子显微镜（TEM）等方法对ZFNPs进行表征测试。MTT法检测ZFNPs对Caki-1细胞的生长抑制作用。2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠（DCFH-DA）染色检测不同处理组细胞内ROS水平。TEM观察ZFNPs能否诱导Caki-1细胞产生自噬泡。免疫印迹法（Western Blot）检测不同处理组细胞自噬强度的变化。DCFH-DA染色、MTT及Western Blot探究ZFNPs杀伤Caki-1细胞过程中诱导ROS与自噬的调控机制。研究结果尺寸、形貌均一的ZFNPs具备可用于MRI的顺磁性。ZFNPs对Caki-1细胞具有剂量及时间依赖性杀伤效应,在此过程中,ZFNPs以剂量及时间依赖的方式诱导Caki-1细胞产生ROS,而N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）可减少ROS的积累,并减弱ZFNPs的杀伤效应。ZFNPs亦可诱导Caki-1细胞产生自噬,渥曼青霉素（Wortmannin）可抑制Zn NPs引起的微管相关蛋白1轻链3-二型（LC3-II）蛋白积累,并减弱ZFNPs的杀伤效果。ZFNPs与海藻糖（Trehalose）联用则会诱导更强的肿瘤杀伤效应,机制为Trehalose可增加ZFNPs杀伤Caki-1细胞过程中ROS的积累及促死亡自噬的强度。在此过程中,NAC抑制ROS的产生可减弱ZFNPs诱导的自噬强度,Wortmannin抑制自噬亦可减少ROS的积累。研究结论ZFNPs可诱导ROS及促死亡自噬交互调控杀伤Caki-1细胞,有望在肾癌的诊疗过程中发挥重要作用。
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