以毛囊干细胞作为种子细胞构建组织工程表皮的研究

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组织工程皮肤是最早被批准生产并应用于临床的组织工程器官。但现阶段的组织工程皮肤所选用的种子细胞多为分化能力有限的组织细胞,因此存在着诸如生长周期有限、结构和功能缺失等问题。而毛囊干细胞(hair Follicle Stem Cells,hFSCs)如能作为种子细胞构建组织工程皮肤可以解决这些问题。本研究以人成纤维细胞作为饲养层细胞,从拔出的毛发中培养出表达hFSCs标志物CK15和整合素α6的细胞,同时在形态上证明培养出的细胞具有向皮脂腺细胞分化的趋势;在类胚体形成实验中,形成的类胚体在形态上完全组织化,构成了相对完整的类表皮组织;在体内实验中,我们将人hFSCs注入到裸鼠皮下组织中,观察人hFSCs在体内的分化情况,证明人hFSCs在体内复杂环境的影响下,呈现出分化的多样性;本实验又将人hFSCs在体外诱导分化形成表皮角质形成细胞,并在气-液面培养条件下构建出具有表皮结构特征的组织工程表皮,其厚度可达160μm。在电镜观察下,可见细胞胞质内出现了明显的角蛋白,进一步的蛋白检测表明构成工程表皮的细胞表达CK10,证明细胞中所形成的角蛋白属于表皮角质形成细胞所特有的角蛋白类型。综上所述,本研究从拔出的毛发中培养出人hFSCs,并证明培养出的人hFSCs具有多向分化潜能。同时,诱导人hFSCs分化形成表皮角质形成细胞,并在体外构建出组织工程表皮。
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