【摘 要】
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目的:原核表达(pET28a-TPM)日本血吸虫磷酸丙糖转移酶(Sj-TPM),免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用,寻找新的血吸虫疫苗候选分子。方法:IPTG诱导表达p
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目的:原核表达(pET28a-TPM)日本血吸虫磷酸丙糖转移酶(Sj-TPM),免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用,寻找新的血吸虫疫苗候选分子。方法:IPTG诱导表达pET28a-TPM后产物以SDS-PAGE分析,用阳性病人血清经预吸收后作western-blot反应。纯化重组日本血吸虫磷酸丙糖转移酶,以50μg/100μl、100μg/100μl和200μg/100μl免疫BALB/c小鼠,尾蚴攻击模型小鼠,计算减虫率、减卵率,观察它们的抗血吸虫感染作用;病例切片观察肝脏组织中肉芽肿的变化。同时观察免疫前、感染前及剖杀前各组小鼠血清特异性IgG抗体。结果:IPTG诱导表达后SDS-PAGE分析,所表达的蛋白质约为31kDa,该融合蛋白均可被经预吸收后阳性病人血清所识别。用重组Sj-TPM的基因工程疫苗免疫 BALB/c小鼠,1、2及3组诱导的减虫率分别为:27.1%(P<0.05),32.1%(P<0.05),35.2%(P<0.05);1、2及3组诱导的肝组织减卵率分别为:34.2%(P<0.05),39.29%(P<0.05),43.66%(P<0.05)。病理可见重组 Sj-TPM组小鼠肝脏表面较光滑,质地较软,色泽略带暗红色,隐约可见少量灰白色小点,虫卵结节较少;生理盐水组小鼠肝组织中可见大量的虫卵肉芽肿形成,肉芽肿体积较大,周围有大量炎细胞浸润,较多的肝细胞变性坏死,间接ELISA结果显示,免疫前、感染前及剖杀前各组小鼠血清特异性IgG抗体逐渐升高。结论:本研究结果表明日本血吸虫磷酸丙糖转移酶可能是一种潜在的血吸虫病疫苗候选分子。
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