【摘 要】
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Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白是骨骼肌肌内结缔组织的主要纤维性胶原蛋白,在动物的不同生长阶段中其分布和特性有所变化,进而影响肌肉的嫩度。本研究采用自然放牧条件下的6、9、12、18月龄的乌珠穆沁羊,取其半腱肌和背最长肌,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR方法对Ⅰ型胶原蛋白基因COL1A1、COL1A2和Ⅲ型胶原蛋白基因COL3A1在肌肉组织中的相对表达量进行了分析。并利用间接免疫荧光染色方法对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白
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Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白是骨骼肌肌内结缔组织的主要纤维性胶原蛋白,在动物的不同生长阶段中其分布和特性有所变化,进而影响肌肉的嫩度。本研究采用自然放牧条件下的6、9、12、18月龄的乌珠穆沁羊,取其半腱肌和背最长肌,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR方法对Ⅰ型胶原蛋白基因COL1A1、COL1A2和Ⅲ型胶原蛋白基因COL3A1在肌肉组织中的相对表达量进行了分析。并利用间接免疫荧光染色方法对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白在骨骼肌肌内结缔组织中的分布状态进行了分析。并从肌肉组织中提取了Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,用SDS-PAGE方法和羟脯氨酸法对其进行了定性定量分析。建立了分离Ⅰ型胶原蛋白的双向电泳方法。结果表明,在不同的月龄间,I型胶原蛋白基因COL1A1和COL1A2和Ⅲ型胶原蛋白的相对表达量在9、12月龄中相对较高。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量随着月龄的增长而显著增加(p<0.05),并且半腱肌肌内结缔组织中Ⅰ型胶原蛋白的含量显著高于背最长肌(p<0.05)。Ⅰ型胶原蛋主要分布在肌内膜和肌束膜,Ⅲ型胶原蛋白主要分布在肌内膜,少量分布在肌束膜。双向电泳方法分离Ⅰ型胶原蛋白的电泳条件为上样方式为水花上样,第一向等电点聚焦时间为50000 V·h上样量为640 μg/mL。
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