乙型肝炎病毒(HBV)感染是人类健康的重要问题。对乙型肝炎病毒感染受体的研究，不仅在理论上可以深入地了解HBV和人肝细胞的相互作用机制，而且对乙型肝炎的治疗、预防策略的制订及抗病毒药物的研究都将发挥重要的指导作用。但HBV受体至今仍未确定。　　鳞片状细胞癌抗原Ⅰ(SCCA1)是丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)超家族的成员，具有多种变异体。有报道其中的两种（BP和AJ515706）能通过HBV的preS1促进表达SCCA1的细胞与HBV的结合。本研究从HepG2细胞中扩增出的SCCA1(A1)却不具备HBV结合能力。将A1的C末端与BP的C末端（aa342后）互换，获得的A1-BP能够结合HBV，而BP-A1却不能。A1与BP的C末端仅有3个氨基酸的差异，其中2个位于反应位点环域。一级结构分析发现在该区域内，A1的疏水性较弱，而BP和AJ515706的疏水性较强。将A1的aa349位从亲水性的谷氨酸突变为强疏水性的缬氨酸，则可获得HBV结合能力。反之，将BP同一位点的缬氨酸突变为谷氨酸，则丧失HBV结合能力。本工作首次发现SCCA1反应位点环域的疏水性影响其与HBV的结合。　　SCCA2是serpin家族的另一个成员，与SCCA1具有高度同源性。目前还没有对其在HBV结合中功能的研究报道。本研究同时从HepG2细胞中扩增出的SCCA2基因，和A1基因有91％的同源性，但不具备HBV结合能力。　　该部分工作从蛋白质结构角度为HBV受体研究提供了新思路。　　细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性检测不仅对如HBV这样的免疫致病病毒的免疫病理研究有重要意义，在其治疗性疫苗的评价中更是必不可少。随着荧光染料及其检测仪器的开发，荧光染料在CTL活性分析在的应用日益广泛。Calcein AM是一种出色的活细胞标记荧光染料。本研究利用Calcein AM标记CTL活性反应中的靶细胞，建立了安全、可靠、简捷的CTL杀伤活性检测方法——Calcein荧光测定法，取代传统的51Cr释放法。　　通常的CTL活性分析需要制备表达靶抗原的细胞系，费时而复杂。本研究利用痘病毒制备简单、宿主广泛等特性，构建了含HBsAg基因的重组痘病毒WR-S，以WR-S感染细胞作为刺激细胞及靶细胞。研究表明，WR-S可以有效地表达、呈递HBsAg抗原。WR-S感染细胞作为刺激细胞或/和靶细胞都可以检测到明显的HBsAg特异性CTL杀伤活性，其效应和表达HBsAg的成系细胞P815-S相当。这非常有利于今后对不同抗原的CTL效应研究。　　慢性乙型肝炎感染的治疗仍是一个世界性难题，如何更有效地产生广泛而持续的免疫应答是问题的关键。通过不同种类抗原组合进行混合免疫能更有效地诱导产生免疫反应，在HIV等的治疗性疫苗的研制中方兴未艾。本研究以含HBsAg基因的DNA疫苗pcDNA3-S、重组痘病毒WR-S和重组蛋白抗原rHBsAg进行九种不同组合的免疫，分析了免疫后不同时间点的体液反应和CTL杀伤活性。三种抗原的体液反应强弱顺序为rHBsAg、 WR-S、pcDNA3-S; rHBsAg的体液反应记忆效应最强，但WR-S产生抗体的速度最快。诱导产生HBsAg特异性CTL杀伤活性高低顺序为WR-S、pcDNA3-S、rHBsAg。CTL杀伤活性高低与体液反应的强弱、有无没有明显关系。不同抗原组合中，DNA疫苗和重组痘病毒进行免疫组合，可以产生最强的CTL反应;而且以DNA疫苗初免，重组痘病毒加强的效果为最好。本工作为慢性乙肝的免疫治疗策略提供了依据。