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目的探讨生地黄不同提取物对损伤血管内皮的保护作用及作用机制，并比较95%乙醇提取物和水煎总提物对血管保护作用的强弱，同时为进一步明确生地黄发挥血管保护作用的有效成分奠定基础。方法1.选取体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)作为研究对象，采用肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导HUVEC细胞生成血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)损伤模型。2. MTT比色法筛选生地黄有效部位以及各有效部位的量效、时效，并检测对HUVEC细胞活力的影响，同时采用流式细胞术检测各有效部位对HUVEC细胞周期的影响来探讨增殖机制。3.在诱导模型及药物作用量效、时效都已确定的基础上，采用MTT法检测各有效部位对TNF-α诱导HUVEC细胞增殖的影响，通过硝酸还原酶法检测各部位细胞上清液中的NO及酶联免疫吸附试验检测ET-1、试剂盒检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量来探讨生地黄各有效部位对内皮功能保护作用的影响。4.酶联免疫吸附实验检测TNF-α诱导HUVEC细胞粘附因子、趋化因子含量来探讨生地黄各有效部位对损伤血管的保护作用，吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)阻滞后粘附因子、趋化因子含量来探讨生地黄保护血管损伤的可能作用机制。5.免疫印迹法(Western-blotting)检测IκBα、胞浆/胞核NF-κBp65蛋白表达来探讨生地黄各有效部位对NF-κB信号通路的影响。结果1. MTT实验结果显示：生地黄提取物促HUVEC细胞增殖的有效部位是95%乙醇提取物、水煎总提物、50%甲醇部位。95%乙醇提取物、水煎总提物、50%甲醇部位最佳剂量分别为75μg·mL-1、150μg·mL-1、60μg·mL-1(P<0.01或P<0.05)，最佳作用时间均是36h(P<0.01或P<0.05)。对HUVEC细胞增殖结果显示：与对照组相比较各部位细胞存活率显著性升高(P<0.01或P<0.05)。流式细胞术结果显示：与对照组相比各有效部位均可使S期比例显著性增加(P<0.01或P<0.05)。2.对TNF-α诱导HUVEC细胞增殖结果显示：与对照组相比，模型组细胞存活率明显降低；与模型组比较，各有效部位不同浓度细胞存活率明显增高(P<0.01或P<0.05)。检测NO、iNOS和ET-1结果显示：与对照组相比，模型组NO含量显著降低，iNOS、ET-1含量显著升高；与模型组相比，各给药组均可使NO含量显著升高，iNOS、ET-1含量显著降低(P<0.01或P<0.05)。3. ELISA检测VCAM-1、MCP-1结果显示：与对照组相比，模型组VCAM-1、MCP-1的含量显著性升高(P<0.01或P<0.05)；与模型组相比，各给药组组均可使VCAM-1、MCP-1含量显著性降低(P<0.01或P<0.05)。阻滞剂结果显示：与对照组相比，模型组VCAM-1、MCP-1蛋白表达显著上调(P<0.01或P<0.05)；与模型组相比，阻滞剂组及阻滞剂和有效部位共同作用组均可使VCAM-1、MCP-1蛋白表达显著性下调(P<0.01或P<0.05)。4. NF-κB信号通路结果显示：与对照组相比，模型组IκBα、胞浆NF-κBp65蛋白表达显著下调，胞核蛋白NF-κBp65表达显著上调(P<0.01或P<0.05)；与模型组相比，各有效部位均可显著性的上调IκBα、胞浆NF-κBp65蛋白表达，使胞核蛋白NF-κBp65表达显著性下调(P<0.01或P<0.05)。5.对生地黄水煎总提物和95%乙醇提取物在最佳剂量和最佳时间条件下对HUVEC保护作用进行对比研究，从检测细胞增殖、iNOS、NO/ET-1、VCAM-1、MCP-1研究的结果显示：与对照组相比，模型组细胞增殖显著减少、NO降低，iNOS、ET-1增加，VCAM-1、MCP-1上调；与模型组相比二部位均可使细胞增殖显著升高、NO增加，iNOS、ET-1降低，VCAM-1、MCP-1下调，且95%乙醇提取物作用强度强于水煎总提物。6.从95%乙醇提取物中冲得的50%甲醇部位为有效成分的进一步富集部位，其主要成分为环稀醚萜类和苯乙醇苷类，提示地黄发挥血管保护作用的有效成分为环稀醚萜类和苯乙醇苷类。结论1.生地黄可能通过抑制NF-κB信号通路的激活，从而下调其下游因子VCAM-1、MCP-1的表达进而抑制血管内皮受损、保护血管功能，提示这可能是其发挥血管保护的作用机制之一。2.生地黄发挥血管保护作用的有效成分主要位于50%甲醇部位，主要成分类型为环稀醚萜类和苯乙醇苷类。