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登革病毒属黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),共有4个血清型,即登革1、2、3、4型病毒。病毒基因组为具有感染性的单股正链RNA,共编码3种结构蛋白和7种非结构蛋白。其中NSl(Nonstructural Glycoprotein 1)是一种非结构糖蛋白,在黄病毒科中高度保守,确切功能尚未阐明。已有的研究表明,登革病毒Ns1蛋白可以诱导机体产生高滴度抗体,并可使小鼠免于登革病毒的致死性攻击,在诊断及疫苗研制中具有重要意义。而近年来的研究进一步发现在登革热发病早期的病人血清中可以检测到登革病毒NS1蛋白,且其出现时间早于IgM抗体,这为登革病毒的早期快速诊断提供了一条新的思路。本研究使用原核及真核表达的重组NS1蛋白制备抗登革病毒NS1组特异及型特异鼠单克隆抗体,并应用此单抗及NS1蛋白抗原表位集中区肽段初步建立了登革病毒抗原、抗体的检测方法,以探讨NS1蛋白及其抗体在登革病毒诊断中的应用。具体实验内容包括三个部分:
一、登革病毒NS1蛋白在大肠杆菌及在昆虫细胞中的表达和纯化;
二、抗登革病毒NS1单抗的制备及检测NS1蛋白的MAC-ELISA方法建立;
三、NSl蛋白抗原表位的分布及其在登革病毒抗体检测中的应用。