论文部分内容阅读
研究糖尿病鼠视网膜和增殖期糖尿病视网膜病变患者血液和玻璃体液中microRNAs及其调控生长因子的表达变化。昆明小鼠雄性随机分成实验组和对照组(各12只)。实验组腹膜下按着第一天40mg/kg、第二天20mg/kg、第三天20mg/kg体重注射1%链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)形成1型糖尿病模型,对照组腹膜下按着第一天40mg/kg、第二天20mg/kg、第三天20mg/kg体重注射柠檬酸缓冲液,72小时后采尾血检测随机血糖。血糖≥16.7mmol/l即为实验组建模成功。每周测量实验各组小鼠体重和血糖1次。在成模后8周用实时定量链式聚合酶反应(q RT-PCR)对视网膜microRNA-126、microRNA-296和VEGF进行检测。35只为增殖期糖尿病视网膜病变和对照组21只为无明显诱因的裂孔源性视网膜脱离患者行玻璃体切割术时取玻璃体液和血液,用qRT-PCR检测其microRNA-126、microRNA-296和VEGF的表达。体重结果显示注射前实验组22.02g±1.29g与对照组22.80g±1.26g之间差异无统计学意义(t=0.167,p>0.05);STZ腹膜下注射8周后,实验组20.95g±0.31g与对照组39.52g±0.43g二者之间差异有统计学意义(t=6.47,p<0.05)。血糖结果显示注射前糖尿病小鼠平均血糖6.49±0.68mmol/l,对照组平均6.60±0.59mmol/l,二者之间差异无统计学意义(t=0.621,p>0.05);STZ腹膜下注射72小时后,糖尿病组平均血糖20.24±1.65mmol/l,正常组平均5.36±0.32mmol/l,二者间差异显著,具有统计学意义(t=9.26,p<0.05):至8周时,糖尿病组平均血糖19.50±1.84mmol/l,正常组平均血糖4.48±0.28mmol/l,二者之间差异显著,具有统计学意义(t=2.42,p<0.05)。期间,糖尿病组血糖均>16.7mmol/l,正常组保持在4.1-6.4mmol/l。q RT-PCR结果显示,与对照组相比,microRNA-126在糖尿病鼠视网膜表达降低86%、在增殖期糖尿病视网膜病变患者玻璃体液降低60%、血液降低53%,microRNA-296在糖尿病鼠视网膜表达降低50%、在增殖期糖尿病视网膜病变患者玻璃体液降低13%、血液降低67%,血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)在糖尿病鼠视网膜表达升高61%、在增殖期糖尿病视网膜病变患者玻璃体液升高58%、血液升高28%。糖尿病鼠视网膜8周时和增殖期糖尿病视网膜病变患者血液和玻璃体液中VEGF表达增加,而与此相反,microRNA-126和microRNA-296则表达降低,提示其在糖尿病视网膜病变发展中起重要的调控作用。