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磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol,PI）由磷酸1,2-二脂酰甘油和肌醇组成,不仅是细胞膜的组成物质,而且其生物学功能和在药物上应用越来越成为研究热点。高纯度PI可用于预防、治疗老年痴呆症,还能与临床常用抗癌药物联用,具有安全、有效、靶向及增效的优异特性。基于目前制备高纯度PI的工艺存在成本高、操作复杂等问题,本课题在优化磷脂定量分析方法的基础上,以碱性醇溶液提取-冷冻分离-乙醇浸提法和钙盐沉淀法制备高纯度PI,并对产品中PI分子种类进行鉴定,具体内容如下:首先,优化了高效液相色谱（HPLC）法定量分析磷脂中PI的分析条件。采用Si-60色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以正己烷:异丙醇:1%乙酸（8:8:1,v/v/v）为流动相A,异丙醇:正己烷:0.06%乙酸铵（6:4:0.1,v/v/v）为流动相B,进行梯度洗脱,样品PI回收率在98.41%100.97%之间,相对标准偏差为1.25%,同时,进一步采用核磁磷谱(31P-NMR)法对PI进行定量分析,并与HPLC结果进行了比较,其结果表明两种方法均可用来对磷脂中的PI进行定量分析。其次,采用碱性乙醇提取法提取PI,并对提取工艺进行了优化。粉末磷脂进行脱糖处理,并以其为原料,将碱性乙醇提取液冷冻制备粗品PI,称为粗品PI-1,碱性乙醇提取残渣称为粗品PI-2。以PI含量为指标,优化得粗品PI-1最佳提取条件为:料液比1:25（g/m L）,提取温度40oC,98%乙醇:25%氨水=100:3（v/v）,提取时间40 min,冷冻时间16 h,冷冻温度-20oC,提取次数3次,所得粗品PI-1含量为82.62%,得率为68.61%,粗品PI-2含量为55.85%,得率为72.62%。然后,进一步优化了分别以粗品PI-1为原料,采用乙醇浸提法纯化和以粗品PI-2为原料,采用钙盐沉淀法纯化工艺。以PI含量和得率为衡量指标,产品PI-1的最佳提取条件为:浸提时间132 min,浸提温度28oC,料液比1:32（g/m L）,浸提次数3次,所得产品PI-1纯度为94.05%,得率为64.27%;产品PI-2的最佳提取条件为:乙醇浓度为56%,萃取液体积比(V正己烷:V乙醇溶液)1:2,pH 8.5,Ca2+添加量为0.4 g/L,萃取次数为3次,最终产品PI-2纯度为90.26%,得率为59.43%。最后,采用LC-MS方法对所得产品PI的分子种类进行鉴定。结果表明,由粗品PI-1、PI-2纯化得到产品PI中均含有8种PI分子类型,并且棕榈酰/亚油酰磷脂酰肌醇含量均最高。此外,副产品磷脂酰乙醇胺（PE）含量较高,具有一定的应用价值。通过以上研究,得到了制备高含量肌醇磷脂的工艺路线,最大限度的回收了磷脂中的肌醇磷脂,工艺简便、产品含量高,为工业化生产高含量肌醇磷脂提供了新思路。