急性髓细胞白血病乳腺癌耐药蛋白的临床研究

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目的:探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)与急性髓细胞白血病(AML)的临床特征、药物敏感性、预后的关系。方法:应用半定量逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测5例对照组及20例AML患者治疗不同时期的骨髓单个核细胞中BCRP基因表达水平;应用流式细胞术(FCM)检测20例AML标本的骨髓单个核细胞BCRP蛋白水平;并运用MTT比色法检测20例AML标本骨髓单个核细胞在抗肿瘤药物不同浓度下(2.5-40ug/ml)的体外药物敏感性。结果:25例标本(20例AML,5例对照)BCRP基因表达水平个体差异性较大,从0到1.950不等。对照组和AML组BCRP基因表达水平,分别为0.047±0.0401、0.302±0.33(P=0.002)。20例AML患者中BCRP mRNA表达量各不相同,由低到高依次为初治敏感组(5例)、复发组(8例)和临床耐药组(11例),平均表达水平分别为0.052±0.037、0.254±0.288、0.372±0.364,初治敏感组与临床耐药组差异显著(P=0.001)。12例初治AML患者BCRP mRNA表达阳性者5例,CR11例,CR1率20.0%;阴性者7例,CR15例,CR1率71.4%,二者差异显著(P=0.0000)。AML不同FAB分型中BCRP基因表达水平及阳性率也有差异,M5最高,其次是M3、M4,M2最低,M5与M2 BCRP相对表达量分别为0.447±0.4260、0.177±0.269(P=0.206),阳性率分别为50%、25%(P=0.325)。FCM检测BCRP蛋白不同程度表达,9例阳性者均值为37%(区间12.2-93.7%),初治敏感组最低,0.0385±0.0358,复发组和耐药组则明显增高,分别为0.2026±0.2443、0.2905±0.2962,与初治敏感组相比较,均具有统计学意义(P<0.05)。与BCRP mRNA表达相关性比较显示,11例BCRP蛋白表达阴性者有4例为BCRP mRNA表达阳性。MTT法提示,对20例AML样本的骨髓单个核细胞,柔红霉素在16倍峰浓度下的抑制率高于单倍峰浓度,分别为(33.87±16.36)%、(16.36±18.37)%(P<0.05),呈现浓度依赖性现象。就高敏例数而言,16倍峰浓度下为4例,占20%,而单倍峰浓度下仅为1例,占5%,两者之间差异有显著性(P<0.05)。在16倍峰浓度下,柔红霉素对初治敏感组和临床耐药组、BCRP mRNA阳性表达组(7例)和阴性表达组(13例)的平均抑制率明显不同,分别为(44.49±20.89)%、(20.89±9.34)%(P<0.05),(20.58±3.67)%、(39.26±15.25)%(P<0.05)。结论:AML患者的BCRP基因表达水平显著高于对照组;BCRPmRNA阳性的初治者CR率低于阴性者;临床耐药组BCRP基因表达水平明显高于敏感组;AML各亚型BCRP基因表达情况无显著差异性;耐药组与复发组的BCRP基因表达水平明显高于初治敏感组;不同BCRP基因表达水平的细胞对药物呈现浓度依赖性现象,16倍峰浓度下高度敏感率高于单倍峰浓度(P<0.05)。16倍峰浓度下,柔红霉素对初治敏感组的平均抑制率高于耐药组,BCRP mRNA阳性表达组的平均抑制率高于阴性表达组。
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