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目的:通过观察细胞间紧密连接蛋白（TJs）、水通道蛋白5（AQP5）、黏蛋白5ac（MUC5ac）等相关因子的动态变化,从肺气血屏障的结构与功能角度出发,探讨养阴清肺汤加味对重症肺炎支原体肺炎（SMPP）肺气血屏障受损的调节机制,并与中医的“润燥”治法相关联,为中医药治疗SMPP的研究提供新思路。材料与方法:将120只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、养阴组、阿奇组及阿奇+养阴组,除正常组小鼠外,各组小鼠经麻醉后使用1010CCU/ml的MP菌液滴鼻构建SMPP模型,模型建立成功后开始进行药物干预,分别在第3、7、10、14天进行取材。观察小鼠的一般状态;分别称取小鼠肺组织的干重及湿重,测定小鼠肺组织干/湿重比值;计算小鼠肺指数;采用HE染色的方法光镜下观察小鼠肺组织病理形态改变,并计算病理评分;免疫组织化学法检测肺组织中紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达;q PCR法对肺组织中Occludin、ZO-1、AQP5、MUC5ac的基因含量进行测定;Western blot法检测小鼠肺组织中Occludin、ZO-1的蛋白表达;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液中MUC5ac的含量。结果:1.从小鼠的一般状态观察看,除正常组外,其余各组小鼠在MP感染后第3天起均出现不同程度的精神倦怠,饮食量减少,活动量减少,甚至部分小鼠出现竖毛反应,鼻腔出现分泌物,其中阿奇+养阴组反应最轻,模型组反应最重。第7天时,模型组及各给药组小鼠状态均为最低水平,后逐渐改善,其中阿奇+养阴组小鼠一般状态改善最为明显,阿奇组次之。2.在MP感染后,各组小鼠肺指数均高于正常组（P＜0.05）,且在第7天达峰值。与模型组比较,各个时间点内各组小鼠的肺指数均低于模型组小鼠（P＜0.05）。在第10天,阿奇组与阿奇+养阴组小鼠的肺指数低于养阴组小鼠（P＜0.05）,第14天,阿奇组小鼠的肺指数虽低于养阴组小鼠,但差异无统计学意义（P＞0.05）,阿奇+养阴组小鼠的肺指数低于养阴组小鼠（P＜0.05）。比较各组小鼠肺组织的干湿比发现,除正常组外,各时间点各组小鼠肺组织干湿比均降低（P＜0.05）,第7天达到最低值,后逐渐上升,但始终低于正常组（P＜0.05）。各个时间各给药组小鼠肺组织干湿比均高于模型组（P＜0.05）。第7、10天,阿奇组与阿奇+养阴组均高于养阴组。第14天各给药组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。3.肺组织病理结果显示,模型组小鼠肺部病理改变明显,渗出大量炎性细胞,毛细血管瘀血严重,呼吸膜明显增厚。养阴组小鼠肺泡内炎性细胞渗出较模型组少,肺泡间隔增宽。阿奇组小鼠有炎性细胞浸润,轻度的肺组织瘀血。阿奇+养阴组小鼠也可见炎症细胞浸润。病理评分结果显示,模型组小鼠的病理评分在各个时间点均高于各个给药组（P＜0.05）,各组小鼠的病理评分均在第7天时达到峰值。与养阴组比较,阿奇组的病理评分在各个时间点均较低（P＞0.05）,阿奇+养阴组除第3天外,其余各个时间点的病理评分均低于养阴组（P＜0.05）,且在第14天,阿奇+养阴组的病理评分均低于中药或西药单独给药组（P＜0.05）。4.通过免疫组化的方法观察SMPP小鼠肺组织中Occludin及ZO-1的分布发现,正常组小鼠Occludin、ZO-1主要表达于肺泡上皮以及毛细血管内皮细胞,细胞膜及胞浆边缘存在强阳性染色。模型组小鼠Occludin、ZO-1表达定位失去连续性,阳性染色明显减少。养阴组小鼠Occludin、ZO-1的阳性染色强于模型组。阿奇组Occludin、ZO-1在较多的肺泡壁上皮或肺泡间质毛细血管内皮细胞仍呈波浪状分布。阿奇+养阴组Occludin、ZO-1的阳性染色略高于各个单给药组。5.比较各组小鼠肺组织中Occludin、ZO-1 m RNA表达发现,在MP感染后,各组小鼠肺组织中的Occludin ZO-1 m RNA表达均较正常组下降（P＜0.05）,各给药组对于两者均有不同程度的调节作用,其中联合用药效果最佳。在MP感染后的第3天,各组小鼠肺组织中的AQP5 m RNA含量均较正常组小鼠有不同程度的下降,而MUC5ac m RN A含量均较正常组小鼠有不同程度的升高,阿奇霉素对AQP5及MUC5ac的调节作用早于养阴清肺汤加味,中药主要在SMPP后期发挥调节作用,且与阿奇霉素联合应用效果最佳。6.在MP感染后,各组小鼠肺组织中的Occludin、ZO-1蛋白表达均较正常组下降（P＜0.05）,各给药组均高于模型组,在第7天下降到谷值;第3天起,养阴组虽高于模型组,但较阿奇组及联合用药组低,且差异有统计学意义（P＜0.05）。7.在MP感染后,各组小鼠肺泡灌洗液中的MUC5ac含量均比正常组小鼠高（P＜0.05）,第3天时,养阴组与模型组小鼠差异无统计学意义（P＜0.05）,第7天后,各给药组MUC5ac含量均比模型组低（P＜0.05）,第10天开始,阿奇+养阴组下调优势明显（P＜0.05）。结论:1.养阴清肺汤加味对SMPP肺屏障功能受损具有调节作用,可以通过增加Occludin以及ZO-1的表达来降低细胞膜的通透性,恢复肺气血屏障的功能,进一步探求了中医药治疗SMPP的作用靶点。2.养阴清肺汤加味可以通过促进AQP5的表达,抑制MUC5ac的分泌来调节肺内的水液代谢,从而达到“润燥”的效果,可有效治疗SMPP。