鸭圆环病毒的流行病学调查

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dashiliangzeyi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)是圆环病毒科(Circoviridae)圆环病毒属(Circovirus)的一新成员,2008年ICTV将DuCV列入圆环病毒属中的暂定种。DuCV感染可导致鸭子羽毛凌乱、生长迟缓、体重减轻等症状。本研究拟从病原学和血清学两个方面对DuCV感染情况进行流行病学调查,研究内容共分为三部分:1、我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的流行病学调查2006-2007年间从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东五个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PCR方法检测DuCV的感染情况。结果显示上述5个省份均检出了DuCV,病、死鸭中DuCV的个体阳性率为81.63%(280/343),群体阳性率为94.44%(34/36)。此外,还对其中167只病、死鸭样品进行了DuCV和REV共感染的检测,发现DuCV与REV共感染的比率较高,为40.12%(67/167)。研究结果表明我国鸭群中已普遍存在DuCV的感染,且鸭群中DuCV与REV的共感染也普遍存在。2、DuCV Rep蛋白的原核表达及其抗血清制备通过PCR方法扩增DuCV FJ0601株Rep基因的完整ORF,按正确的阅读框架将其克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒转化BL21宿主菌后,经IPTG诱导表达。诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,将表达产物从凝胶中回收,免疫4周龄小白鼠,3次免疫后,采血分离血清。所得抗GST-Rep多克隆抗血清分别与经PCR检验为阳性的病鸭脾脏、胸腺、法氏囊组织的冰冻切片进行间接免疫荧光试验(IFA),结果在感染DuCV的发病鸭三种免疫器官中均可检测到由阳性细胞组成的局部病灶,表明大肠杆菌表达的Rep融合蛋白至少保留了部分天然Rep蛋白的抗原性。3、检测DuCV抗体ELISA方法的建立及初步应用为建立检测鸭圆环病毒抗体的间接ELISA方法,采用PCR技术,扩增DuCV部分Cap基因,构建原核表达质粒pET-32a-Cap。IPTG诱导表达后以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法并初步应用于临床检测。结果显示:DuCV Cap基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达;Western blot检测表明,表达的重组Cap蛋白能与鸭圆环阳性血清发生特异性反应;建立的间接ELISA方法的蛋白最佳包被量为400ng/孔,血清最佳稀释度为1∶50,阳性的Cut-off值为0.298。以建立的间接ELISA方法进行山东省健康鸭群DuCV抗体检测结果表明,健康鸭群中DuCV抗体个体检出率为15.61%(252/1614),肉鸭场的DuCV抗体个体阳性率13.37%(162/1211),群体阳性率为88.89%(16/18);种鸭场的DuCV抗体个体阳性率为22.33%(90/403),群体阳性率为75%(9/12)。实验结果表明该方法具有重复性好、特异性高的特点,可用于DuCV血清学调查。
其他文献
采用哲夫法则,根据重庆市2002—2006年国内生产总值、非农业人口、社会商品零售额、第一产业产值、第二产业产值、第三产业产值,结合"一小时经济圈"城市体系的现状特征,联系
论述国际铁路行业标准(IRIS)和能力成熟度模型集成(CMMI)的特点及其在铁路通信信号研发设计企业的应用。通过对两者的对比分析,以及两者在企业中推广应用过程的论述,为铁路企
习近平总书记的《之江新语》一书中包含着丰富的思想政治工作思想,提出了有效的政治教育方法策略,蕴含着深刻的思想政治教育现实启示,对进一步加强和改进新形势下宣传思想工
物联网的前景在业界一直被看好,但这种新型的信息技术对通信的安全性和信息的隐私性提出了新的挑战。如何保护物与物、端到端的传输通信安全成为物联网技术面临的关键问题之
培养学生在初中科学教育课堂中的问题意识与发散思维,是新课程教学的重要内容和基本点,因此,教师在教学过程中应重视启发学生独立思考、发散思维的能力,探索有效提高学生问题
随着对外开放程度的日益加深,我国银行业面临着内忧外患的局面。资本充足率不高、不良贷款率攀升、过于单一的盈利模式,一直以来都是困扰我国各大银行的难题。与此同时,越来
针对工程填土地层及废弃防空洞,拟采用锤击沉管挤密碎石桩法进行加固处理。但在处理部分防空洞后,因震动大、噪音高,对周边居民和民居影响严重而停工。通过多次试验,摸索出钻
随着极端机和微电子技术的飞速发展,基于数字信号处理的频谱分析已经应用到各个领域并且发挥着重要作用。该"数字频谱分析仪"以89S52单片机为控制核心,以FPGA为数据采集、分
以新时期工业污水处理为研究对象,从当前工业污水处理再利用的可行性分析、工业污水处理再利用的普遍性分析、工业污水处理方式分析以及工业污水处理再利用的发展前景展望等
公路工程施工项目成本管理是施工企业的重要的经济活动,是企业日常运转的中心工作,做好施工企业的项目成本管理工作,具有十分重要的意义。 The cost management of highway