骨质疏松症是危害人类健康的主要疾病之一,寻找切实有效的抗骨质疏松药物已成为当今医药领域的重大课题。中药以其资源丰富、价格便宜、毒副作用小等诸多优势在防治骨质疏松症方面具有较大的潜力与优势。随着中药现代化的发展,中药治疗骨质疏松可望深入到细胞分子水平并从中筛选出高效、稳定、低毒的中药单体或复方组分,充分发挥中药防治骨质疏松症的优势。本研究目的是基于细胞水平筛选具有抑制骨吸收、促进骨形成作用的中药。第一部分进行了体外破骨细胞和成骨细胞的培养。采用1α,25-（OH）₂VitD₃诱导兔骨髓细胞法获得破骨细胞,以形态学观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色和骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色来鉴定破骨细胞;培养MC3T3-E1Subclone 14（小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14）细胞,采用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色鉴定成骨细胞。第二部分进行了中药的选择和制备。根据骨质疏松的中医病因病机,从20余种具有补肝肾、强筋骨、和胃健脾、活血化瘀等功能的中药处方中选出30余种具有潜在的抗骨质疏松药理作用的中药。然后对中药进行了75%醇提和水煎,得到20余种中药粗提物浸膏。第三部分进行了中药对破骨细胞活性作用的研究。采用TRAP染色阳性细胞计数、TRAP活力测定和骨吸收陷窝的数量及面积为指标检测每种中药醇提物和水煎物的低、中、高剂量组（2 mg/L、20 mg/L、200 mg/L）对破骨细胞活性作用的影响。结果表明:黄柏、大血藤、豨莶草、槲寄生、锁阳、当归、吴茱萸、韭菜子、狗脊、威灵仙、续断的醇提物和水煎物对破骨细胞活性有显著性的抑制作用,且成剂量依赖性;墨旱莲、红花、肉苁蓉、黄芪的水煎物对破骨细胞活性有显著性的抑制作用,且成剂量依赖性;木瓜、女贞子醇提物对破骨细胞活性有显著性的抑制作用,且成剂量依赖性;何首乌醇提物和水煎物破骨细胞活性有显著性抑制作用;独活和牛膝对破骨细胞活性基本没有抑制作用。第四部分进行了中药对成骨细胞增殖分化作用的研究。采用MTT法检测中药对成骨细胞增殖作用的影响,结果表明:黄柏、大血藤、墨旱莲、红花、木瓜、续断、女贞子、牛膝的醇提物和水煎物高剂量组对成骨细胞增殖均有显著性的抑制进作用,低、中剂量组均能显著性促进成骨细胞增殖;槲寄生、肉苁蓉、何首乌、吴茱萸均对成骨细胞的增殖有促进作用,其中,槲寄生醇提物和水煎物高剂量组具有显著性的促进作用,肉苁蓉醇提物各剂量组和水煎物高剂量组具有显著性的促进作用,何首乌醇提物和水煎物低、中剂量组具有显著性的促进作用,吴茱萸醇提物高剂量组和水煎物各剂量组具有显著性的促进作用;威灵仙醇提物能促进成骨细胞增殖,但不具有显著性差异,水煎物抑制成骨细胞增殖;当归除醇提物高剂量组外均能促进成骨细胞增殖,其中醇提物中剂量组和水煎物高剂量组具有显著性差异;狗脊、黄芪、独活的醇提物和水煎物高剂量组及黄芪、独活的醇提物中剂量组均抑制成骨细胞增殖,其他剂量组均能促进增殖且狗脊和独活低剂量组具有显著性差异;豨莶草、锁阳、韭菜子抑制成骨细胞的增殖,韭菜子具有显著性抑制作用。采用ALP活力测定检测中药对成骨细胞分化作用的影响,结果表明:黄柏、大血藤、狗脊、红花、黄芪、续断、牛膝的醇提物和水煎物均能显著性促进成骨细胞分化,其中中剂量组促进作用最好;槲寄生、吴茱萸、锁阳、墨旱莲、木瓜的醇提物和水煎物均能显著性促进成骨细胞分化,且成剂量依赖性;当归、肉苁蓉的醇提物和水煎物均能显著性促进成骨细胞分化,醇提物中剂量促进作用最好,水煎物成剂量依赖性;女贞子醇提物和水煎物均能显著性促进成骨细胞分化,醇提物成剂量依赖性,水煎物中剂量促进作用最好;豨莶草、何首乌的醇提物和水煎物低、中剂量组能显著性促进成骨细胞分化,中剂量组作用最好;独活的醇提物低、中剂量组和水煎物中剂量组能显著性促进成骨细胞分化,中剂量组作用最好;韭菜子、威灵仙醇提物和水提物虽然能促进成骨细胞分化,但不具有显著性差异。综上所述,本研究通过体外破骨细胞模型和成骨细胞模型筛选发现,既能抑制骨吸收又能促进骨形成的中药有:黄柏、大血藤、墨旱莲、红花、木瓜、续断、女贞子、槲寄生、肉苁蓉、何首乌、吴茱萸、当归、黄芪、狗脊、锁阳;抑制骨吸收的中药有:豨莶草、韭菜子、威灵仙;促进骨形成的中药有:牛膝、独活。