抗IL-5抗体联合抗IL-13抗体对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的影响

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目的与意义支气管哮喘(bronchial asthma,以下简称哮喘)是肺部慢性炎症性疾病,能影响到各个年龄段的人群。在过去的40年里,全球哮喘患者的发病率、死亡率和所造成的经济负担都明显增加。哮喘已成为国际社会需要共同面对的问题。哮喘是由多种细胞及细胞因子参与的,以气道慢性炎症、可逆的气道阻塞和气道高反应性(AHR)为特征的慢性气道炎症性疾病[1]。嗜酸性粒细胞(Eos)的反常聚集和活化被认为是哮喘发病的主要原因。在Eos分化、成熟、生存和迁移到循环系统过程中有许多细胞因子和趋化因子参与[2-3],IL-5在此过程中发挥了重要作用[4]。IL-5通过依赖及非依赖两种机制促使肺部Eos增多[5],IL-5非依赖性机制主要通过IL-13刺激气道上皮细胞产生,这两种机制不存在排它效应,对Eos在过敏性疾病中的功能起集成作用[6]。到目前为止,AHR的机制仍不明确。本研究通过抗IL-5抗体(Anti-IL-5 Ab)、抗IL-13抗体(Anti-IL-13 Ab)、Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab(Anti-IL-5 antibody combined Anti-IL-13 antibody)治疗哮喘小鼠模型,观察比较各组小鼠BALF中Eos、中性粒细胞、淋巴细胞以及巨噬细胞等炎症细胞的数量以及各种抗体对AHR所造成的影响,探讨Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab在哮喘发病中的作用,为今后哮喘的治疗提供思路。方法①50只雌性Balb /c小鼠随机分成正常组、哮喘组、Anti-IL-5 Ab组、Anti-IL-13 Ab组和Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组。②用清洁级Balb /c小鼠构建哮喘模型,采用腹腔注射卵蛋白(OVA)和氢氧化铝混悬液处理动物。③采用瑞氏染色对哮喘小鼠进行支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞分类及计数。④应用小鼠肺功能仪检测气道阻力的变化。结果①Anti-IL-13 Ab组上述症状与哮喘组比较缓解不明显,Anti-IL-5 Ab组与哮喘组比较小鼠烦躁不安、点头呼吸,略有减轻;Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组小鼠点头呼吸,腹肌抽搐等症状较哮喘组明显减轻,毛色正常。②哮喘组小鼠细胞总数、Eos、中性粒细胞、淋巴细胞计数均显著高于正常组(P<0.01),Anti-IL-5 Ab组细胞总数及各炎症细胞数较哮喘组减少(P<0.05),Anti-IL-13 Ab组与哮喘组比较无差异(P>0.05)。Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组各炎症细胞数均少于单独单抗治疗组(P<0.05)。③乙酰甲胆碱(Mch)的激发下,哮喘小鼠的气道阻力较正常组小鼠气道阻力增高(P<0.05),哮喘组小鼠气道阻力与Anti-IL-5 Ab及Anti-IL-13 Ab两组比较变化不明显(P>0.05);Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组小鼠气道阻力与Anti-IL-5 Ab及Anti-IL-13 Ab两组比较明显下降(P<0.05)。结论:①Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组可明显抑制哮喘小鼠肺部Eos、中性粒细胞、淋巴细胞等炎症细胞浸润。②Anti-IL-5 Ab联合Anti-IL-13 Ab组可抑制哮喘迟发反应,降低AHR,改善肺功能,为治疗哮喘提供新的解决办法。
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