【摘 要】
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目的:探讨榛仁粕可溶性膳食纤维降血脂作用及其机制。方法:(1)测定榛仁粕中的营养成分,并采用单因素及响应曲面法建立榛仁粕中的可溶性膳食纤维的提取方法。(2)高血脂模型建立:75只健康雄性SD大鼠,分为空白组(15只)、造模组(60只),空白组喂食普通饲料,造模组喂食高脂饲料、5周后大鼠眼眶静脉丛取血,测定TG、TC,判断造模是否成功,模型成功后,第6周开始造模组分为模型组、阳性组(血脂康)、榛仁粕
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目的:探讨榛仁粕可溶性膳食纤维降血脂作用及其机制。方法:(1)测定榛仁粕中的营养成分,并采用单因素及响应曲面法建立榛仁粕中的可溶性膳食纤维的提取方法。(2)高血脂模型建立:75只健康雄性SD大鼠,分为空白组(15只)、造模组(60只),空白组喂食普通饲料,造模组喂食高脂饲料、5周后大鼠眼眶静脉丛取血,测定TG、TC,判断造模是否成功,模型成功后,第6周开始造模组分为模型组、阳性组(血脂康)、榛仁粕可溶性膳食纤维高、低剂量组,各组大鼠数量至少为10只并继续给与高脂饲料喂养,各组按照阳性组给血脂康0.108g/kg,榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组给与榛仁粕可溶性膳食纤维0.9g/kg、榛仁粕可溶性膳食纤维低剂量组给与榛仁粕可溶性膳食纤维0.45g/kg剂量给药,给药持续5周。(3)指标的检测:(1)给药结束后,对各组大鼠进行LEE’s指数测定。(2)ELISA法测肝组织中TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALT、AST水平,血清中TC、TG水平。(3)取空白组、模型组、可溶性膳食纤维高剂量组大鼠肝脏组织和脂肪组织进行HE染色和油红O染色,检测榛仁粕降脂作用的结构影响。(4)免疫印迹法检测肝脏组织中ACC、CPT1A、SCD-1、FAS蛋白的表达情况。(5)肠道微生物多样性分析肠道微生物的变化。结果:(1)利用单因素影响实验对膳食纤维提取率进行比较,筛选出最佳酶用量为8%,最佳温度55℃,最佳提取时间在1.5h,最佳p H为8,并在此基础下应用响应面法优化得到最佳提取率为15.5%。(2)与空白组相比,造模组大鼠血清中TC(P<0.05)、TG(P<0.01)含量均升高,说明造模成功。(3)各组大鼠之间的LEE’s指数表明榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组肥胖程度明显减轻。肝脏内TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST测定结果显示:与空白组相比,模型组TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低。与模型组相比,阳性组(血脂康组)TC、TG、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平升高;榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组TC水平明显降低,LDL-C、TG水平降低,HDL-C水平升高;榛仁粕可溶性膳食纤维低剂量组只有TC差异具有统计学意义(P<0.05),其水平表现为降低。血清中TC、TG测定结果显示:与空白组相比,模型组TC(P<0.01)、TG(P<0.01)、TC、TG水平明显升高;与模型组相比,阳性组(血脂康组)、榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组TC(P<0.01)、TG(P<0.01),TC、TG水平明显降低。(4)组织染色:(1)HE染色:与空白组相比,模型组呈现脂肪空泡多,细胞核呈不规则状态;与模型组比较,榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组空泡数明显减少,细胞核趋向于正常化状态,细胞形态饱满,排列整齐紧密。(2)油红O染色:与空白组相比,模型组红染明显多于空白组;与模型组比较,榛仁粕可溶性膳食纤维高剂量组红染明显减少。(5)免疫印迹检测结果:与空白组相比,模型组大鼠肝组织ACC、CPT1A、SCD-1、FAS表达量差异具有统计学意义,其中CPT1A表达量增加,ACC、FAS表达量显著增加,SCD-1表达量减少。与模型组相比,阳性组大鼠肝组织ACC、SCD-1表达量差异具有统计学意义,ACC表达量显著降低、SCD-1表达量升高;可溶性膳食纤维组大鼠肝组织Acc、SCD-1、FAS表达量差异具有统计学意义,其中Acc、SCD-1、FAS表达量显著降低;可溶性膳食纤维组鼠肝组织SCD-1、FAS表达量差异具有统计学意义,其中SCD-1、FAS表达量显著降低。(6)肠道微生物多样性分析表明Blautia,Clostridiaceae的增加可能是影响血脂的主要因素。结论:榛仁粕可溶性膳食纤维可改善高血脂大鼠肝脏的血脂水平,改善肝脏细胞状态,减少肝脏脂肪,缩小脂肪细胞,改善肠道微生物多样性。其可能的作用机制是调节肝脏脂质相关合成酶ACC、SCD-1、FAS表达。
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