菟丝子总黄酮对大鼠多囊卵巢综合征模型的影响

来源 :河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bingshanhu
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目的:观察菟丝子总黄酮对脱氢表雄酮联合人绒毛膜促性腺激素(DHEA联合HCG)及来曲唑致大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型的影响,并探讨菟丝子总黄酮对多囊卵巢综合征的治疗作用及特点。方法:采用DHEA联合HCG致大鼠PCOS模型:将70只21日龄雌性SD大鼠,喂养至23日龄后,随机选取10只作为空白对照组,其余大鼠进行造模处理,每日上午颈背部皮下注射DHEA6mg/(100g·d)+0.2mL注射油剂,下午皮下注射1.5 IU/d HCG+0.4mL注射用水,造模持续21d,空白对照组大鼠注射等体积注射溶媒(0.2mL注射油剂及0.4mL注射用水)。从造模第16天开始,对大鼠进行1个周期的阴道涂片检察,模型成功标准:阴道上皮持续角化。从中选取50只,并随机分为5组,分别为模型对照组、达英-35组(0.3392mg·kg-1)、菟丝子总黄酮大、中、小剂量组(0.2g·kg-1、0.1g·kg-1、0.05g·kg-1),每组10只。除空白对照组及模型对照组灌服0.5%CMC外,其余各给药组分别给予相应药物,连续3周。在最后1次用药2h后,称重,麻醉大鼠,并进行腹主动脉采血、离心,测定血清中T、E2、INS、LH、FSH、P、PRL的含量;摘取子宫和卵巢,称重,记录并计算其脏器指数;对卵巢、子宫、胰腺组织进行摘除、剥离,固定、蜡块包埋后进行HE染色,在光镜下观察并记录各个脏器的组织形态变化。此外,通过免疫组化法,观测卵巢中AR、BCL-2、Bax、TNF-α、IGF-l平均光密度,以及下丘脑GnRH平均光密度、垂体GnRH-R的平均光密度。采用来曲唑致大鼠PCOS模型:取70只6周龄雌性SD大鼠,随机选取10只作为空白对照组,其余大鼠进行造模处理,每日灌服来曲唑混悬液1mg/(kg.d),空白对照组灌服等量溶媒,共计21天。自造模第16天开始,每天对大鼠进行连续1个周期的阴道涂片检查,选取50只造模成功的大鼠,并随机分为5组,分别为模型对照组、达英-35组(0.3392mg·kg-1)、菟丝子总黄酮大、中、小剂量组(0.2g·kg-1、0.1g·kg-1、0.05g·kg-1),每组10只。除空白对照组及模型对照组灌服0.5%CMC外,其余各给药组分别给予相应药物,连续3周。在最后1次用药2h后,称重,麻醉并进行腹主动脉采血,测定血清中T、E2、LH、FSH、P、PRL、INS、GnRH、TNF-α、HDL-C、LDL的含量;摘取子宫和卵巢,称重,记录并计算其脏器指数;光镜下观察并记录右侧卵巢组织、肾上腺组织、胰腺组织的组织形态变化。同时用免疫组化法观测下丘脑中、垂体和左侧卵巢中AR平均光密度。结果:DHEA联合HCG致大鼠PCOS模型复制成功,与空白对照组比较,模型对照组大鼠卵巢及子宫指数显著升高(P<0.01);血清T、E2、LH、LH/FSH、PRL、INS水平显著升高(P<0.01),P水平显著降低(P<0.01),FSH水平明显降低(P<0.05);大鼠下丘脑中GnRH平均光密度显著升高(P<0.01),垂体中GnRH-R平均光密度显著降低(P<0.01),卵巢中AR、Bax、TNF-α、IGF-l平均光密度显著升高(P<0.01)、BCL-2平均光密度显著降低(P<0.01)。与模型对照组比,大、中、小剂量菟丝子总黄酮与达英-35可显著减少PCOS大鼠的卵巢及子宫指数(P<0.01);可显著降低血清中T、E2、LH、LH/FSH、PRL、INS水平(P<0.01)、显著升高血清中P水平(P<0.01),大、中剂量菟丝子总黄酮可明显升高PCOS大鼠血清FSH水平(P<0.05);大、中、小剂量菟丝子总黄酮均可显著降低PCOS大鼠下丘脑中GnRH、卵巢中AR、Bax、TNF-α的平均光密度(P<0.01),大、中剂量菟丝子总黄酮可显著升高大鼠垂体中GnRH-R平均光密度及卵巢中BCL-2平均光密度(P<0.01),显著降低卵巢中IGF-l的平均光密度(P<0.01),小剂量菟丝子总黄酮可明显升高大鼠垂体中GnRH-R及卵巢中BCL-2的平均光密度(P<0.05),明显降低卵巢中IGF-l的平均光密度(P<0.05)。来曲唑致大鼠PCOS模型复制成功,与空白对照组比较,模型对照组大鼠卵巢指数显著升高(P<0.01),子宫指数显著降低(P<0.01);血清中T、LH、LH/FSH比值、LDL、PRL、INS、GnRH、TNF-α水平显著升高(P<0.01),P、E2、HDL-C的水平显著降低(P<0.01),血清中FSH水平明显降低(P<0.05);下丘脑、垂体及卵巢中AR平均光密度显著升高(P<0.01)。与模型对照组比,各剂量菟丝子总黄酮均可显著降低大鼠卵巢指数(P<0.01)、显著提高子宫指数(P<0.01);各剂量菟丝子总黄酮亦可使模型大鼠血清中LH、LH/FSH比值、T、PRL、LDL及GnRH水平显著降低(P<0.01),显著升高大鼠血清中P、HDL-C水平(P<0.01),大、中剂量菟丝子总黄酮均可显著降低INS、TNF-α水平(P<0.01)、可显著升高血清中E2水平(P<0.01)、明显增加FSH水平(P<0.05);大、中、小剂量菟丝子总黄酮均可显著降低PCOS大鼠下丘脑、垂体及卵巢中AR平均光密度(P<0.01)。结论:本研究结果提示菟丝子总黄酮可改善DHEA联合HCG及来曲唑致大鼠多囊卵巢综合征模型的影响,并改善由于雄激素水平过高、下丘脑-垂体-卵巢轴亢进而引起的多囊卵巢综合征,可有效地缓解多囊卵巢综合征引起的不育症状,为菟丝子治疗多囊卵巢综合征的临床应用提供了实验基础。
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