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背景乳腺癌(Breast cancer)是女性常见恶性肿瘤之一,致死率较高,已成为严重威胁我国女性生命的严重疾病之一。随着分子生物学的日益发展,靶向性治疗受到越来越多的关注,寻找到与乳腺癌治疗相关的调控基因变得尤为重要。磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)是丝氨酸合成通路的第一个酶。研究发现乳腺癌细胞需要PHGDH保持增殖和存活,且在乳腺癌中有PHGDH过量表达。近几年对miRNAs的研究发现,不同的miRNAs在肿瘤中的作用也不同,它可分为癌基因或抑癌基因参与人体的一系列生命活动,miRNAs对靶基因蛋白的调控成为研究热点。本课题以PHGDH为靶基因,预测针对靶基因3"UTR的miRNAs,选取6个可能相关的miRNAs进行后续研究,分析是否存在miRNA调控靶基因PHGDH导致乳腺癌的发生,根据实验结果进行后续治疗乳腺癌的可行性分析。目的本研究旨在探讨在雌激素受体阴性乳腺癌中靶基因PHGDH的miRNA分子调控机制,分析通过miRNA调控PHGDH在乳腺癌细胞中的作用和治疗的可行性。方法①采用生物信息学工具预测能够调控目的基因PHGDH的miRNAs;②qRT-PCR实验方法验证MCF-7、T-47D、ZR-75-1和MDA-MB-231细胞中PHGDH mRNA和预测相关miRNAs的表达水平；③采用miRNA mimics上调MDA-MB-231细胞中miRNA表达水平,通过qRT-PCR及Western-blotting方法验证靶基因PHGDH的表达水平；④采用雌二醇(E2)及他莫昔芬(TAM)结合miRNA mimics对上述细胞进行处理,用CCK-8方法来检测细胞的凋亡或增殖情况。结果①成功运用生物信息学软件预测分析得到miR-27、miR-128、miR-137、miR-759、miR-1290及miR-4718等六个miRNAs具有调控PHGDH的可能；②qRT-PCR结果显示,在预测得到的6个miRNAs中,miR-128与PHGDH mRNA表达存在负相关关系;③通过对MDA-MB-231细胞系转染miR-128 mimics,显示上调miR-128能够抑制PHGDH的表达；④采用miRNA-128 mimics上调miR-128后能够在雌二醇(E2)和他莫昔芬(TAM)干预情况下,MDA-MB-231细胞的生长曲线受到抑制。结论1.上调miR-128能够抑制雌激素受体阴性乳腺癌中PHGDH的表达,并影H响细胞生长。2.1miR-128对雌激素受体阴性乳腺癌进行雌激素治疗具有积极意义。