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背景:铁调素是机体铁代谢的主要调节因子,其代谢紊乱会导致铁超载或者铁缺乏。肝脏是合成铁调素的主要器官。研究发现心脏、肾脏、肠道等器官或组织也可合成铁调素。肾脏铁超载与肾脏纤维化、糖尿病肾病、狼疮性肾炎密切相关。目前动物实验发现肾脏内铁积聚的水平与机体内整体铁积聚程度不相关,肾脏铁调素合成在肾脏内铁积聚中的作用仍不明确。此研究探讨肾脏铁调素合成与肾脏铁积聚、氧化应激及肾脏纤维化的关系。目的:本研究旨在探索肾脏铁调素分泌与肾脏内铁积聚及肾脏纤维化的关系,以及蔗糖铁对肾脏分泌铁调素的调节作用。方法:动物实验:将小鼠分为5组,假手术组、单侧输尿管结扎术后1天、3天、5天、7天组。ELISA法检测血液中铁调素的浓度;采用Western Blotting及免疫荧光技术检测肾脏组织中的铁调素表达;免疫荧光检测肾脏内铁和活性氧含量;Western Blotting检测膜铁转运蛋白(ferroportin FPN1)和二价金属转运蛋白1(divalent metal transporter DMT1)的表达;Masson染色、免疫组化分析及Western Blotting法检测肾脏纤维化程度。细胞实验:划痕实验:使用低糖DMEM+5%胎牛血清培养HK-2细胞,划痕后分别使用O.1mmol/L、1mmol/L、10mmol/L的蔗糖铁及未加蔗糖铁的低糖DMEM培养液处理细胞,每6h观察划痕面积变化;使用0.1mmol/L蔗糖铁刺激HK-2细胞24h后,使用Western Blotting法及qRT-PCR检测铁调素的表达;Western Blotting法检测FPN1、DMT1及细胞纤维化指标;免疫荧光法检测细胞内DMT1的分布、表达以及细胞内铁及活性氧含量。结果:1、ELISA检测显示血清铁调素在UUO模型第1天升高,第3天恢复到正常水平;2、Western Blotting法显示肾脏铁调素在UUO模型第1天开始升高,并且持续高于正常水平,免疫荧光显示铁调素的表达部位与亚铁离子聚集部位高度一致;3、FPN1的表达从第3天开始低于正常,DMT1的表达从第1天开始高于正常;4、UUO模型肾脏内铁及活性氧从第1天开始高于正常;5、病理、免疫组化分析及Western Blotting显示肾脏从UUO模型第5天开始出现明显的纤维化;6、划痕实验显示0.1mmol/L蔗糖铁处理HK-2细胞,不影响细胞迁移,1mmol/L、10mmol/L的蔗糖铁使细胞迁移率降低;7、0.1mmol/L的蔗糖铁处理细胞使细胞铁调素表达增多、细胞内铁及活性氧增多;8、细胞FPN1表达下降、DMT1表达上升;9、细胞纤维化指标表达增加。结论;肾脏分泌的铁调素与肾脏内铁积聚、氧化应激反应及肾脏纤维化相关。肾脏内铁积聚可能与DMT1表达上升,FPN1表达下降有关。蔗糖铁可以上调HK-2细胞的铁调素表达。