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胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一种主要由皮肤、肺、胸腺和胃肠道等的上皮细胞分泌的与IL-7类似的细胞因子。过去,大多数关于TSLP的研究主要集中于它与Th2细胞介导的过敏性炎症反应的关系上。近年来,许多研究表明,TSLP能够调控肿瘤的进展,提示TSLP可作为相关肿瘤治疗的潜在靶点。我们通过数据的分析,发现TSLP基因在肺脏中高表达。我们推测TSLP可能在肺癌的进展中发挥着作用。在小鼠肺癌细胞3LL中过表达TSLP(TSLP-3LL)后,我们发现其细胞生长明显被抑制。体内实验也表明,接种TSLP-3LL细胞的小鼠肿瘤体积明显小于接种正常3LL细胞(Ctrl-3LL)小鼠;同时也观察到前者小鼠的生存期明显延长。为保证细胞的正确增殖,细胞周期被精细而严密的调控。细胞周期蛋白(Cyclin)与 Cyclin 依赖的蛋白激酶(cyclin-dependent protein kinases,CDK)结合,调节 CDK的活性,进而调节细胞周期的进程。对比Ctrl-3LL细胞,我们发现,TSLP-3LL细胞的周期被阻滞在G1期。此外,我们检测到TSLP-3LL细胞中Rb的磷酸化被抑制,CyclinD2的表达水平明显下降,但CyclinD2的mRNA水平无明显变化。因此,TSLP可能通过转录后调控的方式抑制CyclinD2,导致细胞周期的抑制。TSLP与其受体结合后,可以活化STAT5。我们发现,在STAT5抑制剂存在的情况下,TSLP-3LL细胞生长抑制现象基本消失。FBXW7(F-box and WD repeat domain-containing7,FBXW7),是一种含有 7 个串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶复合物的底物识别蛋白,介导细胞内多种蛋白质的泛素化降解。FBXW7可作用于多种转录因子或原癌基因,如Cyclin E、c-Myc、c-Jun、Notch1、Mcl1等,具有重要的生物学意义。目前,FBXW7在T细胞中的作用尚未明确。我们通过他莫昔芬诱导基因敲除系统诱导敲除Fbxw7基因,探讨FBXW7在CD4+T细胞分化中的作用。我们发现,FBXW7的缺陷对Th1、Th2和TTh9细胞的分化无明显的影响,但可以抑制Treg细胞的分化,而促进TTh17细胞的分化。此外,FBXW7的缺陷在蛋白水平和mRNA水平上促进了 IL-17A的合成和分泌;同时也促进TTh17细胞正向调控因子RORyt、RORα和AHR的转录。目前认为影响Th17细胞极化的主要有两种信号通路:IL-6/STAT3和TGF-β/Smad信号通路。我们应用不同的Th17细胞极化条件诱导Th17细胞的极化,发现在anti-TGF-β存在的条件下,FBXW7缺陷同样可以促进Th17细胞的分化,提示FBXW7调节Th17细胞的极化并不依赖于TGF-β/Smad信号通路。综上所述,我们研究了 TSLP抑制小鼠肺癌细胞增殖的机制以及泛素连接酶FBXW7在CD4+T细胞分化中的作用。发现了 TSLP可以通过阻滞细胞周期的G0/G1期抑制肺癌细胞生长,而这种作用与TSLP介导的TSLP-3LL细胞STAT5活化依赖的CyclinD2蛋白水平下降和G1期阻滞相关。在应用可诱导敲除小鼠模型,发现了泛素连接酶FBXW7可以抑制TTh17细胞极化,并对其初步的分子机制进行了探讨,具有重要的研究意义。