姬松茸液体发酵及其保肝胶囊的制备

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目的:(1)优化姬松茸液体发酵培养基的组成,以提高姬松茸发酵菌丝生物量及活性胞外多糖(EPS)的含量;(2)考察液体发酵后的姬松茸对酒精性肝损伤小鼠的肝脏保护作用及肝功能改善的程度;(3)研制开发姬松茸保肝剂型,进行经过液体发酵的姬松茸保肝胶囊的制备工艺及其质量标准的研究。方法:(1)采用响应面分析法,以马铃薯、葡萄糖以及麸皮用量作为影响因子,姬松茸发酵菌丝生物量及胞外多糖的含量作为响应值,采用3因素3水平的Box-Behnken中心组合设计对姬松茸液体发酵培养基的组成进行优化;(2)通过采用高度白酒灌胃建立小鼠酒精性肝损伤模型,实验设计分组进行灌胃,检测血清中ALT和AST的水平,并进行肝脏病理组织学检查;(3)通过考察辅料的吸湿性及流动性等指标筛选最佳辅料,确定姬松茸保肝胶囊的配方组成及制备工艺;(4)对姬松茸保肝胶囊中多糖的含量进行测定及各项检查确定胶囊剂的质量标准。结果:(1)采用响应面分析法最终所得最佳培养基组成为:马铃薯用量为29.88g/100m L,葡萄糖用量为1.01g/100m L,麸皮用量为1.02g/100m L。在此条件下,该模型的菌丝体生物量及发酵胞外多糖含量理论预测最大值分别为1.047g/100m L和0.367g/100m L;(2)与模型组小鼠相比,姬松茸各样品组小鼠中ALT与AST水平分别下降了18%~32%,15%~23%,减缓体重下降;小鼠肝脏切片病理组织学检查,姬松茸液体发酵物各样品组未出现或出现少量死亡细胞及炎症病灶;(3)通过对相关辅料的筛选,最终确定以微晶纤维素作为吸收剂,对其流动性的考察结果显示,流动性良好,并确定了辅料加入比例为1:1(W/V);(4)姬松茸保肝胶囊中多糖含量测定为3.03%,并且各项检查均符合中国药典规定。结论:(1)通过模型验证,响应面分析法能够较好地预测姬松茸液体发酵菌丝体生物量及发酵胞外多糖的含量;(2)液体发酵后的姬松茸对小鼠酒精性肝损伤有一定的肝功能改善及肝脏保护的作用;(3)通过研究确定了姬松茸保肝胶囊的制备工艺及质量标准。
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