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紫花苜蓿(Medicago sativa),豆科,苜蓿属,紫花苜蓿种,是世界上最重要的豆科牧草。其营养丰富,素有“牧草之王”的美誉。维生素E是人体和动物必须从食物中摄取的微量营养素之一,具有重要的生物学功能。本论文通过提高紫花苜蓿叶片中的Vitamin E( Tocopherol )水平,以进一步改良苜蓿的营养品质。尿黑酸异戊烯基转移酶(homogentisate phytyltransferase)是Vitamin E生物合成代谢过程中的限速酶。从紫花苜蓿(WL323)中克隆到该酶的编码基因HPT1,命名为MsHPT1(AY714983)。通过同源性比较分析,该基因与其它植物中已克隆到的HPT1基因有较高的同源性。Southern杂交结果显示,HPT1基因在苜蓿基因组可能存在一个小的基因家族。为验证该基因的功能,构建了35S::MsHPT1正义表达载体,并转化拟南芥。通过高效液相色谱(HPLC)分析,转基因植株叶片中的α-tocopherol的水平比对照中的α-tocopherol的水平有了明显提高。应用RT-PCR技术对转基因植株进行鉴定分析, MsHpt1基因表达水平的不同导致转基因植株叶片α-tocopherol水平的不同,在野生型植株叶片中未检测到MsHPT1基因的表达,说明MsHPT1基因表达水平的差异引起了转基因植株中的α-tocopherol水平的差异。借鉴二倍体苜蓿Medicago trunctula R108的转化技术,从十一个在我国大面积种植的苜蓿品种中筛选到两个适合转化的品种。利用农杆菌侵染法转化苜蓿,以提高苜蓿叶片中的α-tocopherol水平,进一步改良苜蓿营养品质。