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目的:建立体外培养纯化人胚胎嗅鞘细胞(olfactory ensheating ceUsO0ECs)的模型,观察OECs的生长特性,为基础和临床科学研究提供较为理想的OECs培养纯化方法。
方法:选取15例胎龄3~6个月自然流产或水囊引产的胚胎,采用原代培养的方法自人胚胎嗅球分离培养出OECs,利用OECS和成纤维细胞贴壁速度不同的原理,进一步纯化OECs,用神经生长因子受体p75(nerve growth factor receptor,NGFRp75)抗体进行免疫细胞化学染色并统计所得OECs的纯度。
结果:本研究成功培养出人胚胎OECs,在原代培养后的2~5d主要呈巨噬细胞状或多极状,与成纤维细胞很难分辨;培养6d后细胞主要为扁平的双极或三极形态,突起细长。免疫细胞化学染色结果显示纯化后5~10d的细胞纯度可达70%以上。
结论:本研究自人胚胎嗅球分离培养OECs的方法操作简便、实用可行,可为基础和临床对OECs的深入研究提供方法学的依据。